下垂体前葉に新たに見いだされたメタロチオネインのホルモン遺伝子発現との関連

新发现垂体前叶金属硫蛋白与激素基因表达的关系

• 批准号: 06857004
• 负责人: 服部 淳彦
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06857004/
• 关键词: メタロチオネイン; ホルモン遺伝子発現; 下垂体; GH; プロラクチン; cell culture; in situ hybridization; 免疫染色

メタロチオネインは,Znなどの重金属に結合する蛋白質であり,近年本蛋白質の核内における機能が注目されている。本研究では,ラット下垂体細胞株であるMtT/SにE2.INSおよびEGFを複合添加し,in situ hybridization法によるGHおよびPRLmRNA発現と免疫染色によるメタロチオネイン発現を経時的に比較した。メタロチオネインは,3種ホルモン添加後18時間まで対照群と同様にほとんど発現していなかったが,24時間目で急激に発現し(P<0.001).約40%の細胞が陽性像を示した。しかも,メタロチオネイン陽性細胞のうちの約80%において核のみにその存在が認められた。GHmRNA陽性細胞は3種ホルモン添加前には約60%に存在したが,添加後24時間から有意に(P<0.01)減少し,72時間では20%以下に減少した。一方,PRLmRNA陽性細胞は添加前にほとんど認められなかったが,添加後24時間から有意に(P<0.05)増加し,72時間には約5%の細胞が陽性像を示した。以上の結果は,核内に発現したメタロチオネインがホルモン遺伝子発現に関与する可能性を示唆するものである。

金属硫蛋白是一种与锌等重金属结合的蛋白质，该蛋白质在细胞核中的功能最近引起了人们的关注。在本研究中，将 E2.INS 和 EGF 组合添加到大鼠垂体细胞系 MtT/S 中，并比较原位杂交测定的 GH 和 PRL mRNA 表达以及免疫染色测定的金属硫蛋白表达随时间的变化。金属硫蛋白直到添加三种激素后18小时才几乎不表达，与对照组类似，但在24小时时迅速表达(P<0.001)，约40%的细胞呈现阳性图像。此外，在大约 80% 的金属硫蛋白阳性细胞中，仅在细胞核中观察到其存在。在添加三种激素前，约60%的细胞GHmRNA呈阳性，但添加后24小时显着下降（P<0.01），72小时时下降至不足20%。另一方面，添加前几乎观察不到PRL mRNA阳性细胞，但添加后24小时后显着增加(P<0.05)，并且约5%的细胞在72小时时显示出阳性图像。这些结果表明在细胞核中表达的金属硫蛋白可能参与激素基因表达。

项目成果

Atsuhiko Hattori: "Identification of melatonin in plants and its effects on plasma melatonin levels and binding to melatonin receptors in vertebrates." Biochemistry and Molecular Biology international. in press. (1995)

Atsuhiko Hattori：“植物中褪黑激素的鉴定及其对血浆褪黑激素水平和与脊椎动物褪黑激素受体结合的影响。”

Atsuhiko Hattori: "Melatonin inhibits luteinizing hormone releasing hormone(LHRH)induction of LH release from fetal rat pituitary cells." Neuroscience Letters. 184. 109-112 (1995)

Atsuhiko Hattori：“褪黑激素抑制黄体生成素释放激素 (LHRH) 诱导胎鼠垂体细胞释放 LH。”