びまん性呼吸器疾患におけるサーファクタント特異蛋白に関する研究

表面活性剂特异性蛋白在弥漫性呼吸道疾病中的研究

基本信息

批准号：
06770417
负责人：
諏訪部章
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Yamagata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770417/
关键词：
サーファクタントびまん性肺疾患 SP-A 肺胞II型上皮細胞

项目摘要

サーファクタント・プロテイン-A(SP-A)は、サーファクタント特異蛋白の一つであり、脂質の気層液層界面への吸着促進、II型肺胞上皮細胞を介する脂質の取り込み促進および分泌抑制、血清由来サーファクタント阻害因子の不活化、肺胞マクロファージの貪食促進、など多彩な機能を営んでいる.しかし、正常ヒト肺からのSP-Aの分離はこれまで報告がなく、また成人呼吸窮迫症候群や特発性肺線維症など難治性肺疾患におけるSP-Aの動態および機能に関する情報は乏しい.今回我々は、これまで繁雑であったSP-A精製の簡易化を試み、微量臨床検体からSP-Aを分離精製しその動態および機能の追及を目的とした.今年度前半は、基礎的検討として、ラット肺洗浄液からサーファクタントを精製しSP-A分離を試みた.その結果、精製サーファクタントをEGTAで処理しカルシウムをキレートするとSP-Aがサーファクタント脂質より遊離した.このことから、SP-Aがカルシウム依存性にサーファクタント脂質に結合することが判明し、この性質がSP-A精製に応用可能であることを証明した.その成果は裏面の如く論文に掲載した(J.Jpn.Med.Soc.Biol.Interface.,1994,25:89-97).今年度後半はこのシステムを臨床検体に応用すべく実験を進めてきた.臨床検体としては各種肺疾患患者の気管支鏡検査時の気管支細胞洗浄駅または剖検液を用い、現在までこれら洗浄液から数回の超遠心を繰り返すことによりサーファクタントを精製してきた.その結果、剖検肺のサーファクタントから本法を用いてSP-A分離に成功した.また、このSP-Aは、ラットII型肺胞上皮細胞からのサーファクタント脂質分泌を抑制能することが示され、近く学会発表および論文掲載予定である.今後は各種肺疾患からの検体について分析する予定である.

表面活性剂蛋白-A（SP-A）是一种表面活性剂特异性蛋白质，可促进脂质向气液界面的吸附，通过II型肺泡上皮细胞促进脂质摄取并抑制分泌，并抑制血清分泌。 SP-A具有多种功能，例如灭活定量抑制因子和促进肺泡巨噬细胞的吞噬作用，例如肺纤维化等顽固性肺部疾病。关于SP-A在该疾病患者中的动态和功能的信息很少。在本研究中，我们试图通过从少量临床标本中分离和纯化SP-A，来简化以前复杂的SP-A纯化过程。今年调查其动态和功能。上半年，作为基础研究，我们从大鼠肺灌洗液中纯化表面活性剂，并尝试分离SP-A。结果，当纯化的表面活性剂用EGTA处理以螯合钙时，SP-A与表面活性剂脂质分离。由此发现，SP-A以钙依赖性方式与表面活性剂脂质结合，并且该性质被证明适用于SP-A的纯化。结果发表在反面所示的论文中。（J.J pn.Med.Soc.Biol.Interface.,1994,25:89-97)。今年下半年，我们一直在进行实验，将该系统应用于临床标本。来自各种肺部疾病患者的支气管镜标本是检验时用作临床标本。到目前为止，表面活性剂已使用支气管细胞清洗站或尸检液通过重复超速离心多次从这些清洗液中纯化。结果，使用该方法成功地从尸检肺的表面活性剂中分离出SP-A。此外，该SP-A已被证明具有抑制大鼠II型肺泡上皮细胞表面活性剂脂质分泌的能力，计划很快在学术会议上发表并以论文形式发表。我们计划这样做。