成人Still病患者におけるTCRγδ型T細胞抗原レセプター遺伝子の解析

成人Still病患者TCRγδ型T细胞抗原受体基因分析

• 批准号: 06770355
• 负责人: 星野 友昭
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770355/
• 关键词: 成人Still病; TCRγδ型T細胞; 抗原レセプター; サイトカイン; 遺伝子クローニング; Vγ9; Vδ2サブセット; PCR; 細胞内感染菌

成人Still病は重要なリウマチ関連疾患であるが、未だその原因についてよく解明されていない。申請者らは、本症の病因解明の研究の過程において活動期の成人Still病患者2名の末梢血中にTCRγδ型T細胞が有意に増加している事を発見した。そして、このTCRγδ型T細胞は患者の病態の増悪に伴い急激に増加し、改善とともに速やかに減少した。また、このTCRγδ型T細胞は、本症の活動性を示すと言われている血清CRP,ferritinと強く相関していた。さらに、8名の非活動期の成人Still病患者のうち3名は有意に末梢血TCRγδ型T細胞が増加していた。この増加しているTCRγδ型T細胞はVγ9/Vδ2型TCRγδ型T細胞であった。また、末梢血TCRγδ型T細胞が有意に増加している患者の末梢リンパ球はexogenousHSP65に対して著明に反応し様々なサイトカイン(IL-6,GM-CSF,TNF-x,INF-γ等)を産生した(平成5年日本リウマチ学会にて発表、主論文はJ.Rheumatologyに投稿中)。現在、TCRγ,TCRδ遺伝子に特異的なプライマーを用いたRT(reverse transcriptase)-PCR法及びadaptor-ligation法を用いてTCRγ,TCRδ遺伝子のcDNAを増幅し、クローニングしたTCRγ,TCRδ遺伝子の塩基配列を決定している。近年、抗原特異的TCRγδ型T細胞が自己免疫疾患や結核菌、マラリア等の細胞内感染菌との関連が明らかになった。結核菌、マラリア等の細胞内感染菌を認識するTCRγδ型T細胞は極端に偏った抗原レセプターを持つこと(oligoclonality)がすでに明らかにされた。もし、本症におけるTCRγδ型T細胞の抗原レセプターがこれらの細胞内感染菌を認識するTCRγδ型T細胞の抗原レセプターと一致すれば本症の原因としてこれらの細胞内感染細菌による感染が強く疑われる。

成年人的静止病是一种重要的类风湿关节炎疾病，但其原因的原因尚未得到充分了解。在阐明该疾病发病机理的研究期间，申请人发现，两名活跃成人静止病患者的外周血中TCRγδ型T细胞显着增加。随着患者的病理恶化，TCRγδ型细胞迅速增加，并随着改善而迅速降低。此外，这些TCRγδ型T细胞与血清CRP，铁蛋白密切相关，据说该细胞在该疾病中表现出活性。此外，八名不活跃的成人病患者中有3例显着增加了周围血液TCRγδ型T细胞。 TCRγδ型T细胞的数量增加是Vγ9/Vδ2型TCRγδ型T细胞。此外，周围血液TCRγδ型T细胞的外周淋巴细胞对ExogenOSHSP65的反应明显反应，并产生了各种细胞因子（IL-6，GM-CSF，TNF-CSF，TNF-X，INF-γ等）（在1993年的Rheumatorgology和J. Rheumatology中提出）。当前，使用针对TCRγ和TCRδ基因特异的引物，以及克隆的TCRγ和TCRδ基因的核苷酸序列，使用RT（逆转录酶）-PCR和适应性诱导方法扩增TCRγ和TCRδ基因的cDNA。近年来，已经揭示了抗原特异性TCRγδ型T细胞与自身免疫性疾病，结核分枝杆菌和疟疾有关。已经揭示了识别细胞内感染细菌（如结核分枝杆菌和疟疾）的TCRγδ型T细胞具有极为偏见的抗原受体。如果该疾病中TCRγδ型T细胞的抗原受体与识别这些细胞内感染细菌的TCRγδ型T细胞的抗原受体一致，则这些细胞内感染的细菌被强烈怀疑是这种疾病的原因。

项目成果

Hiromatsu,Y.: "Human histocompatibility leukocyte antigen-DR and heat shock protein-70 expression in eye muscle tissue in thyroid-associated ophthalmopathy." J.Clin.Endocrinol.Metabolism. (in press). (1995)

Hiromatsu,Y.：“甲状腺相关眼病眼肌组织中人类组织相容性白细胞抗原 DR 和热休克蛋白 70 的表达。”

Inoue,M.: "Close co-localization of CD4 and a serin esterase-trytase TL2 on the cell surface." Biochm.Bioph.Res.Co.201. 1390-1395 (1994)

Inoue,M.：“CD4 和丝氨酸酯酶-胰蛋白酶 TL2 在细胞表面紧密共定位。”

Honda,J.: "Rapid and sensitive diagnosis of Cytomegalovirus and Pneumocystis carinil pneumonia in patients with hematologic neoplasma by using capillary polymerase chain reaction." British J.Haematol.86. 138-142 (1994)

Honda, J.：“利用毛细管聚合酶链反应快速、灵敏地诊断血液肿瘤患者的巨细胞病毒和卡氏肺孢子虫肺炎。”

Hoshino,T.: "Elevated adenosine deaminase activities in serum of patients with diabetes mellitus." Diabetes Research Clin.Practice.25. 97-102 (1994)

Hoshino,T.：“糖尿病患者血清中腺苷脱氨酶活性升高。”