犬蛔虫抗原の好酸球増多に及ぼす影響についての研究

狗虫抗原对嗜酸性粒细胞增多影响的研究

• 批准号: 06770185
• 负责人: 高本 雅哉
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770185/
• 关键词: 犬蛔虫; 好酸球増多; インターロイキン5; T細胞抗原; 糖鎖

1。犬蛔虫ES抗原の分画、糖鎖の除去及びペプチド鎖の消化ES抗原をHPLCを用いてゲルろ過を行い、分子量によって分画した。各画分はSDS電気泳動により分子量を決定した。ES抗原の糖鎖はエンドグリコシダーゼには耐性であったため、過ヨウ素酸(2.5mM)により酸化し変性させた。プロナーゼ消化またはヒドラジン分解により、ES抗原のペプチド鎖を加水分解し糖鎖のみを未消化のまま残した。2。IL-5産生を誘導する抗原の性状HPLCを用いて分画したES抗原は多くの画分においてIL-5産生を誘導した。それらの画分は電気泳動後PAS染色により濃く染色された。また過ヨウ素酸酸化によりIL-5産生に約50%の低下を認めた。これらのことから、IL-5産生を誘導する抗原のエピトープには糖鎖が含まれる事が示唆された。ペプチド鎖をプロナーゼ消化またはヒドラジン分解で加水分解することにより、IL-5産生は完全に抑制された。このことから、すべてのエピトープはペプチド鎖を含むことが明らかとなった。以上の結果より、IL-5産生を誘導する抗原のエピトープは一部はペプチド部分に一部は糖鎖とペプチドの両方を含むことが判明した。また抗CD4モノクローナル抗体を用いた実験により、糖ペプチドからなるエピトープはCD4陽性T細胞にのみ反応することが示唆された。現在さらにIL-5産生を誘導する抗原エピトープの解析を進めている。

1.犬蠕虫ES抗原的分级、糖链的去除和肽链的消化使用HPLC对ES抗原进行凝胶过滤并根据分子量进行分级。通过 SDS 电泳测定每个级分的分子量。由于ES抗原的糖链对糖苷内切酶具有抗性，因此它被高碘酸(2.5mM)氧化和变性。 ES抗原的肽链被链霉蛋白酶消化或肼消化水解，仅留下糖链未被消化。 2.诱导 IL-5 产生的抗原的特性 使用 HPLC 分级的 ES 抗原在许多级分中诱导 IL-5 产生。电泳后，这些级分通过 PAS 染色进行深度染色。此外，高碘酸盐氧化导致 IL-5 产量减少约 50%。这些结果表明诱导IL-5产生的抗原表位包含糖链。通过链霉蛋白酶消化或肼解作用进行的肽链水解完全抑制了 IL-5 的产生。这表明所有表位都含有肽链。从以上结果可知，诱导IL-5产生的抗原的表位含有一些肽部分，一些同时含有糖链和肽。此外，使用抗CD4单克隆抗体的实验表明，由糖肽组成的表位仅与CD4阳性T细胞发生反应。我们目前正在进一步分析诱导 IL-5 产生的抗原表位。