Mesocestoides由来Th2細胞分化誘導因子の精製と免疫学的解析

Mesocetoides来源的Th2细胞分化诱导剂的纯化及免疫学分析

基本信息

批准号：
11770129
负责人：
高本雅哉
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770129/
关键词：
セリンプロテアーゼ Th2 犬蛔虫旋毛虫好酸球 IgE

项目摘要

寄生線虫が分泌するプロテアーゼが、Th2タイプの免疫応答誘導に関与しているかどうかは興味がもたれるところである。そこで、寄生線虫である犬蛔虫及び旋毛虫の幼虫より分泌されるES抗原を用いてマウスを免疫し、その中に含まれるセリンプロテアーゼのTh2細胞分化に及ぼす影響について検討を加えた。非処理ES抗原で免疫したマウスと、PMSFまたは熱処理によりプロテアーゼを不活化したES抗原で免疫したマウスの免疫反応を比較した。熱処理した抗原により追加免疫を3回行い、最終免疫より1週間後にマウスより脾細胞を採取し、ES抗原刺激により産生されるIL-4,IL-5,IFN-γをELISAで測定した。その結果IL-4産生は各群の間で差がみられなかったが、IFN-γ産生は、熱処理抗原及びPMSF処理抗原免疫群において、産生増強がみられた。また、熱処理群において、IL-5産生のレベルもやや上昇した。各個体におけるサイトカイン産生量の比を比較すると、非処理抗原で免疫した方が、PMSFまたは熱処理抗原免疫群よりIL-4/IFN-γ比が有意に高い値を示した。また、抗原特異的IgG2aのレベルは、熱処理抗原免疫群群において最も高く、非処理抗原免疫群において最も低い値を示した。それとは逆に、IgG1/IgG2a比及び抗原特異的IgEのレベルは非処理抗原免疫群で高い傾向にあった。非処理及びプロテアーゼ不活化処理した旋毛虫ES抗原で免疫したマウスを用いた実験においても、同様の結果が得られた。これらの結果は、これまでに明らかにしたMesocestoides cortiメタロプロテアーゼを用いた実験とほぼ同様の結果であり、寄生蠕虫の分泌するプロテアーゼにより宿主の免疫系がTh2タイプにシフトする可能性が示唆された。

寄生线虫分泌的蛋白酶是否参与诱导 Th2 型免疫反应是很有趣的。因此，我们用寄生线虫秀丽隐杆线虫和旋毛虫幼虫分泌的ES抗原免疫小鼠，并研究其中所含的丝氨酸蛋白酶对Th2细胞分化的影响。我们比较了用未经处理的ES抗原免疫的小鼠和用蛋白酶已被PMSF或热处理灭活的ES抗原免疫的小鼠的免疫反应。用热处理抗原进行3次加强免疫，末次免疫1周后收集小鼠脾细胞，用ELISA测定ES抗原刺激产生的IL-4、IL-5和IFN-γ。结果，各组之间的IL-4产生没有观察到差异，但在热处理抗原和PMSF处理抗原免疫组中观察到IFN-γ产生增加。此外，热处理组中IL-5的产生水平也略有增加。当比较每个个体中细胞因子产生的比率时，用未处理的抗原免疫的组中的IL-4/IFN-γ比率显着高于PMSF或热处理的抗原免疫组。此外，抗原特异性IgG2a的水平在热处理的抗原免疫组中最高，而在未处理的抗原免疫组中最低。相反，在未治疗的抗原免疫组中，IgG1/IgG2a的比率和抗原特异性IgE的水平趋于较高。使用未经处理且蛋白酶灭活的旋毛虫 ES 抗原免疫小鼠的实验中也获得了类似的结果。这些结果与之前使用Mesocestoides corti金属蛋白酶的实验获得的结果几乎相同，表明寄生蠕虫分泌的蛋白酶可能将宿主的免疫系统转变为Th2型。