肝細胞増殖に関与する各種増殖因子の作用機序の解析

多种生长因子参与肝细胞增殖的作用机制分析

基本信息

批准号：
06770163
负责人：
三高俊広
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770163/
关键词：
Rat Hepatocyte Primary Culture Activin A IL-1beta IL-6 TGF-beta Colony DNA synthesis

项目摘要

昨年度までの一連の研究から成熟ラット肝細胞は増殖能力に関して一様ではなく、少なくとも3種類にわけられることがわかった。(1)一つは増殖能力が旺盛な小型な肝細胞で、コロニーを形成するように増殖する(Type I cell)、(2)分裂可能であるがその回数に制限があるように思われる細胞(Type II cell)、(3)まったくDNA合成を行わない細胞(Type III cell)の3種類である。今年度は、肝細胞増殖抑制因子として知られている、Activin A、IL-1β、IL-6、TGF-βが初代培養ラット肝細胞のDNA合成を抑制し、コロニー形成を抑制できるかどうか、又、その作用機序について調べた。具体的には、コロニー形性能に対する作用をみることでType I cellに対する抑制作用の有無を、全体のDNA合成能(BrdUの取り込み:Labeling Index)を調べることでType II cellに対する増殖抑制作用みた。Activin A、IL-1β、IL-6、TGF-βの4因子ともType II cellのDNA合成を濃度依性に抑制することができ、最も抑制作用が強かったのはTGF-βであった。また、その抑制作用は、TGF-βとTGF-βのみが不可逆的で、他の3因子は可逆的であった。コロニー形成を抑制したのはIL-1βのみでActivin A、IL-6にその作用はなかった。換言すればActivin A、IL-6はType I cellに対して無効であった。IL-1βとTGF-βはその作用機序が異なるようで、IL-1βは可逆的に、TGF-βは不可逆的にコロニー形成を抑制した。加えて、IL-1βはコロニー形成過程ではその抑制効果がみられるが、一担形成されたコロニーの細胞に対しては無効であった。TGF-βはいかなるTypeの肝細胞に対しても増殖抑制作用を示した。

直到去年的一系列研究表明，成熟的大鼠肝细胞在增殖能力方面并不统一，可以至少分为三种类型。（1）有三种类型：（1）具有强大增殖潜力的小肝细胞，在菌落中增殖（I型细胞），（2）能够分裂但似乎对所有次数（II型细胞）的数量限制的细胞，以及（3）在所有（III III型细胞）中并非合成DNA的细胞。今年，我们研究了活化素A，IL-1β，IL-6和TGF-β（称为肝细胞生长抑制剂）是否可以抑制原代培养的大鼠肝细胞中的DNA合成及其作用机理。具体而言，通过检查对菌落形状性能的影响，我们研究了是否对I型细胞产生抑制作用，并检查了总体DNA合成能力（BRDU摄取：标记指数），我们观察到了对II型细胞的生长抑制作用。所有四个因素，即激活素A，IL-1β，IL-6和TGF-β，都能够以浓度依赖性方式抑制II型细胞的DNA合成，而TGF-β具有最强的抑制作用。此外，只有TGF-β和TGF-β是不可逆的，而其他三个因素是可逆的。只有IL-1β抑制菌落形成，而激活素A和IL-6无效。换句话说，对于I型细胞，激活素A和IL-6无效。 IL-1β和TGF-β似乎具有不同的作用机理，IL-1β可逆和TGF-β不可逆地抑制了菌落的形成。另外，尽管IL-1β在菌落形成过程中表现出抑制作用，但它对单键型菌落的细胞无效。 TGF-β对任何类型的肝细胞表现出增殖抑制作用。