肝細胞増殖に関与する各種増殖因子の作用機序の解析

多种生长因子参与肝细胞增殖的作用机制分析

基本信息

批准号：
05770159
负责人：
三高俊広
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770159/
关键词：
Hepatocytes Proliferation EGF HGF TGF-alpha FGF Colony

项目摘要

肝細胞のDNA合成を促進させる因子はその作用機序から2つに分けられる。1つはそれ自身で肝細胞を分裂させることができるmitogenであり、もう1つはそれ自身単独では分裂させることができないが、mitogenと共存するとDNA合成を促進させることができるco-mitogenである。今回私は、mitogenとしてEGF、HGF、TGF-alpha、FGFを、co-mitogenとしてinsulin-like growth facto-I、angiotensin-II、norepinephrine、vasopressin、TNFを用いて、EHFを用いた時に見られた初代培養ラット肝細胞のコロニー形成がこれらの因子を用いた時にも見られるかどうか調べた。HGFとTGF-alphaはEGFとほぼ同様の増殖活性を持ち、10ng/mlの濃度ではLabeling indexもコロニー形成も3つの因子に有意差はなかった。コロニーの出現頻度は濃度依存性を示し、10ng/mlの濃度で最大になり、接着した細胞1000個当り約15個だった。EGF、HGF、TGF-alphaをそれぞれ組み合わせてコロニー形成を見てもコロニー数はEGF単独の場合と変わらなかった。acidic FGFとbasicFGFはコロニー形成能はあるが、その頻度は約5個とEGFを用いた時の約1/3であった。co-mitogenは単独では肝細胞のDNA合成を起こすことができなかったが、EGFと共存させると有意にそのDNA合成を促進させることがLabeling indexを調べることでわかった。しかし、co-mitogenにEGF単独で形成したコロニーの数を増加させる作用はなかった。この結果より、肝細胞の中にはEGF、HGF、TGF-alpha、FHFに反応して増殖する非常に増殖能力旺盛な肝細胞が存在しており、成熟ラット肝細胞の約1.5%がその細胞に相当すると考えられる。私は、その細胞が「肝細胞への分化が方向づけられたcommitted progenitor cellである。」と考えている。又、co-mitogenは、このprogenitor cellのまわりに存在する肝細胞に作用し、その細胞の維持・増殖を促進しているのではないかと考えている。

促进肝细胞DNA合成的因素可以根据其作用机理分为两类。一种是一种丝裂原，可以单独划分肝细胞，另一个是无法自行分裂的丝裂原，但是当与有丝分裂原共存时，可以促进DNA合成。 Here, I investigated whether colony formation of primary cultured rat hepatocytes observed when using EHF can also be observed when using these factors using EGF, HGF, TGF-alpha, and FGF as mitogens, and insulin-like growth factor-I, angiotensin-II, norepinephrine, vasopressin, and TNF as co-mitogens. HGF和TGF-Alpha具有与EGF几乎相同的增殖活性，而在10 ng/ml的浓度下，标记指数和菌落形成的三个因素之间没有显着差异。菌落的出现频率取决于浓度，最大浓度为10 ng/ml，每1000个粘附细胞约15个细胞。当通过将EGF，HGF和TGF-Alpha结合观察到菌落形成时，菌落的数量仅与EGF相同。酸性FGF和BasicFGF具有菌落形成能力，但使用EGF时的频率约为5，约为1/3。尽管仅共裂动物无法在肝细胞中进行DNA合成，但我们发现与EGF共存可显着促进其DNA合成，通过检查标记指数。然而，共裂原没有增加单独由EGF形成的菌落数量的影响。基于这些结果，据信肝细胞具有极强的增殖能力，可以响应EGF，HGF，TGF-Alpha和FHF，并且约有1.5％的成熟大鼠肝细胞对应于这些细胞。我认为该细胞是一个致力于分化为肝细胞的祖细胞。还认为共裂作用在该祖细胞周围存在的肝细胞上作用，从而促进这些细胞的维持和增殖。