破骨細胞形成におけるインターロイキン6の役割の解明

阐明白细胞介素 6 在破骨细胞形成中的作用

• 批准号: 06771640
• 负责人: 宇田川 信之
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771640/
• 关键词: 破骨細胞; IL-6; 可溶性IL-6レセプター; IL-11; gp130; 骨芽細胞

破骨細胞形成に関与するインターロイキン6(IL-6)のシグナル伝達系について解析し、以下の結果を得た。(1)骨芽細胞と脾細胞の共存培養系に、IL-6を添加しても破骨細胞の形成は促進されず、そこに可溶性IL-6レセプター(sIL'-6R)を添加すると破骨細胞の形成が認められた。また、IL-6のシグナル伝達分子であるgp130を共通のシグナル伝達分子として利用する他のサイトカインIL-11,Oncostatin M,LIFは単独で破骨細胞形成を促進した。(2)この共存培養系にデキサメタゾンを添加すると、IL-6単独でも破骨細胞の形成は促進された。(3)RT-PCRでIL-6レセプターの発現を調べたところ、破骨細胞の前駆細胞が存在する脾細胞あるいは骨髄細胞画分にそのmRNAは認められたが、骨芽細胞画分には認められなかった。一方、デキサメタゾンで骨芽細胞を処理すると骨芽細胞画分にもIL-6レセプターのmRNAが出現した。(4)ウエスタンブロット解析より、IL-11で処理した骨芽細胞には130kDaタンパク質のチロシンリン酸化は認められなかった。しかし、デキサメタゾンで骨芽細胞細胞を前処理した後にIL-6を添加すると、130kDaタンパク質のチロシンリン酸化が認められた。(5)ヒトIL-6Rを高度に発現するトランスジェニックマウスから得た骨芽細胞と正常マウスに由来する脾細胞の共存培養系で、ヒトIL-6は単独で破骨細胞の形成を促進した。しかし、マウスIL-6にはそのような促進効果は認められなかった。一方、ヒトIL-6Rトランスジェニックマウスの脾細胞と正常マウスに由来する骨芽細胞の共存培養系で、ヒトIL-6は破骨細胞の形成を促進しなかった。以上の結果より、破骨細胞形成を促進するgp130を介するシグナルは骨芽細胞に直接作用することが示された。

分析了与破骨细胞形成的白介素6（IL-6）的信号传导系统，并获得了以下结果。 （1）在成骨细胞和脾细胞的共培养系统中添加IL-6并未促进破骨细胞的形成，并且当将溶解性IL-6受体（SIL'-6R）添加到系统中时，观察到破骨细胞的形成。此外，其他细胞因子IL-11，OnCostatin M和LIF，利用IL-6信号分子GP130作为一个共同的信号分子，仅促进了破骨细胞的形成。 （2）在这种共培养系统中添加地塞米松，即使仅使用IL-6，也可以促进破骨细胞的形成。 （3）当通过RT-PCR检查IL-6受体的表达时，在存在骨细胞祖细胞细胞的脾细胞或骨髓细胞中发现了mRNA，但在成骨细胞馏分中却没有。另一方面，当成骨细胞用地塞米松治疗时，IL-6受体的mRNA也出现在成骨细胞分数中。 （4）蛋白质印迹分析表明，在用IL-11处理的成骨细胞中未观察到130 kDa蛋白的酪氨酸磷酸化。然而，当在用地塞米松预处理成骨细胞后加入IL-6时，观察到130 kDa蛋白的酪氨酸磷酸化。 （5）在从高度表达人IL-6R和源自正常小鼠的脾细胞的转基因小鼠中获得的成骨细胞的共培养系统中，单独的人IL-6促进了骨细胞的形成。但是，在小鼠IL-6中未观察到这种启动子效应。另一方面，在人类IL-6R转基因小鼠和源自正常小鼠的成骨细胞的共培养系统中，人IL-6并未促进骨细胞的形成。以上结果表明，促进骨细胞形成的GP130介导的信号直接对成骨细胞作用。

项目成果

Takahashi,N.et al.: "Postmitotic osteoclast precursors are mononuclear cells which express macrophage-associated phenotypes." Dev.Biol.163. 212-221 (1994)

Takahashi,N.et al.：“有丝分裂后破骨细胞前体是表达巨噬细胞相关表型的单核细胞。”

Sasaki,T.et al.: "Expression of vacuolar H^+-ATPase in osteoclasts and its role in resorption." Cell Tissue Res.278. 265-271 (1994)

Sasaki,T.et al.：“破骨细胞中液泡 H+-ATP 酶的表达及其在吸收中的作用。”