無尾両生類における下垂体神経葉ホルモン合成活動の変動の解析

无尾两栖动物垂体神经小叶激素合成活性波动分析

基本信息

批准号：
05740494
负责人：
兵藤晋
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1994
项目状态：
已结题

项目摘要

両生類は、脊椎動物が陸上へ進化する中間に位置している。下垂体神経葉ホルモンが両生類の体液浸透圧調節機構においてどのような役割をはたしているかを明らかにするため、ウシガエルの個体発生(特に変態)の過程において、正常および浸透圧刺激にともなうバソトシン(VT)遺伝子の発現量の変動を調べた。平成4年度に作製した、ヒキガエルのVT mRNAに対する合成DNAプローブを用い、ノーザンブロット法により解析した。VT遺伝子の発現は、足指形成期のステージ(St)7〜10ですでにみられた。発現量は個体発生とともに増加したが、特に前肢が伸びるSt20において顕著な(統計的にも有意な)増加を示した。このSt20は、幼生が陸上に進出する変態最盛期に相当する。雄の成体を高浸透圧刺激(絶水および30%海水中での飼育)にさらすと、VT mRNA量は増加した。絶水による上昇は統計的にも有意であった。一方、幼生を30%海水中で飼育したところ、St15以後で、有意な増加を示した。St10以前では、発現量の増加はほとんど見られなかった。St10以前では、VT投与にともなう体重の増加(水の吸収)もほとんどおこらないことが、他の研究者により示されている。この時期では、VT産生ニューロンに浸透圧刺激に対する反応性がないだけでなく、標的器官の反応性も存在しないと考えられる。今回、ウシガエルでは、陸上に進出する変態最盛期にVTの合成が顕著に増加すること、VT産生ニューロンは変態始動期から浸透圧刺激に対する反応性を獲得することが明らかとなった。すなわち、ウシガエルが変態にともなって陸上に進出していくために、VTが非常に重要な役割を果たしていることが示唆される。今後さらに、標的器官におけるVT受容体の動態を明らかにできれば、VTの役割をより明確なものにできると考えている。

两栖动物处于脊椎动物向陆地进化的中间阶段。为了阐明垂体神经叶激素在两栖动物渗透调节机制中的作用，我们研究了牛蛙个体发育（特别是变态）过程中加压素（VT）在正常和渗透刺激中的作用，并研究了基因表达的变化。水平。使用 1992 年制备的蟾蜍 VT mRNA 合成 DNA 探针，通过 Northern 印迹进行分析。 VT 基因的表达已在脚趾形成的第 7 至 10 阶段（St）观察到。表达水平随着个体发育而增加，但在 St20（前肢伸展时）表现出特别显着（且具有统计学意义）的增加。该 St20 对应于幼虫移至陆地时的变态高峰期。当成年雄性受到高渗刺激（缺水并在 30% 海水中饲养）时，VT mRNA 水平增加。由于缺水而导致的增加在统计上也很显着。另一方面，当幼虫在30%海水中饲养时，St15后观察到显着增加。在St10之前，几乎没有观察到表达水平的增加。其他研究人员表明，在 St10 之前，几乎没有与 VT 给药相关的体重增加（吸水）。在这个阶段，不仅产生 VT 的神经元对渗透刺激没有反应，而且靶器官反应似乎也不存在。在这项研究中，我们发现，在牛蛙中，当青蛙移至陆地时，VT合成在变态高峰期显着增加，并且产生VT的神经元从变态初期就获得了对渗透刺激的反应性。这表明VT在牛蛙通过变态向陆地扩张的过程中发挥着极其重要的作用。我们相信，如果能够进一步阐明靶器官中VT受体的动态变化，就能够进一步阐明VT的作用。