筋ジストロフィーマウスを用いた循環系のメカノセンサー機構に関わる分子薬理的研究

使用肌营养不良症小鼠进行循环系统机械传感机制的分子药理学研究

基本信息

批准号：
05772040
负责人：
田中芳夫
金额：
$ 0.7万
依托单位：
University of Shizuoka
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

組織血流の筋原性の自己調節機構や血管攣縮・高血圧などの脈管病変との関連性が深い心脈管系への動力学的刺激により発生する収縮機能発現過程におけるメカノセンサー機構を明らかにする目的で、ラット、ウサギから摘出した脳動脈、肺動脈に内腔圧上昇や伸展刺激を与えて発現する筋収縮反応を薬理学的手法により解析して以下の新知見を得た。1.ア-テリオグラフを利用して抽出フラット脳動脈への内腔圧上昇により発生する血管収縮反応を解析し、外液Ca^<2+>依存性の筋原性収縮に対し、ストレッチチャネルを抑制することが知られているアミロライドが、脱分極性および薬物受容体を介した収縮反応に比較してより選択的に抑制することを見い出し、平滑筋細胞膜上に存在するアミロライド感受性のイオンチャネルが内腔圧上昇もしくは伸展刺激の受容部位である可能性を示唆した。この成績は、「抵抗血管に関する第4回国際シンポジウム」(バ-モント、米国、1994年1月)で発表し、英語論文として公表するための準備を進めている。2.ウサギより抽出した肺動脈標本への伸展刺激による反応は、インドメタシン、アスピリンにより消失することから、シクロオキシゲナーゼ代謝物が産生・遊離することにより発生すること、また、内皮細胞が存在する場合にのみ収縮反応が発現することを見い出し、内皮細胞がこの刺激の受容部位である可能性を明らかにした。現在、内皮細胞の細胞内Ca^<2+>シグナルの測定や糖鎖処理などを行い、刺激受容部位の特定を行っている。以上、脈管系では、動力学的刺激を感知する機構に多様性が存在する可能性を示した。現在、メカノセンサー部位の一つであると想定されているジストロフィンが欠損しているmdxマウスを用いて血管への伸展・脱分極性・薬物受容体刺激を介する反応性の変動について基本的検討を行うとともに、パッチクランプを用いたイオンチャネルの活性化変動を検討するための準備を進めている。

阐明心血管系统动态刺激引起的收缩功能表达过程中的机械传感器机制，其与组织血流的肌源性自动调节机制以及血管痉挛和高血压等血管病变密切相关。等采用药理学方法分析了大鼠和家兔分离的脑动脉和肺动脉受到管腔内压力升高或拉伸刺激时发生的肌肉收缩反应，得到了以下新发现。 1.使用动脉描记器分析由提取的平坦大脑动脉中的管腔内压力增加引起的血管收缩反应，并抑制舒张通道以抵抗外部流体Ca 2+ 依赖性肌源性收缩，已知阿米洛利会导致这种收缩。我们发现平滑肌细胞膜上存在的阿米洛利敏感离子通道是增加的腔内压力或拉伸刺激的受体位点，这表明了这种可能性。这些结果已在“第四届抵抗船只国际研讨会”（美国佛蒙特州，1994 年 1 月）上发表，目前正在准备将其作为英文论文发表。 2.对家兔肺动脉标本进行拉伸刺激所引起的反应被吲哚美辛和阿司匹林消除，这表明该反应是由于环氧合酶代谢物的产生和释放而发生的，并且只有在内皮细胞存在时才会发生收缩。发现这种反应发生，并揭示内皮细胞可能是这种刺激的受体位点。目前，我们正在测量内皮细胞中的细胞内Ca ^ 2+ 信号并处理糖链以识别刺激接收位点。如上所述，我们已经表明，感知血管系统动态刺激的机制可能存在多样性。我们使用缺乏抗肌营养不良蛋白（目前被认为是机械传感器位点之一）的 mdx 小鼠，对药物受体刺激介导的血管延伸、去极化和反应性变化进行了基础研究。还准备使用膜片钳检查离子通道激活的变化。