歯周炎病巣局所におけるリンパ球の遊走・定着機構の解析歯肉線維芽細胞に対するBリンパ球の接着に関与する分子機構の解析

局部牙周炎病灶淋巴细胞迁移沉降机制分析 B淋巴细胞与牙龈成纤维细胞粘附的分子机制分析

基本信息

批准号：
05771589
负责人：
村上伸也
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

炎症歯周組織へBリンパ球が定着・集積する分子機構を解明する目的で、歯肉の主要構成細胞の1つである線維芽細胞(FB)および同細胞が産生する細胞外マトリックス(BCM)に対するBリンパ球の接着能がどのような制御を受けているのかを解析した。研究実施計画に従い、まずマウスの正常B細胞及び種々のクローン化されたBリンパ球系腫瘍細胞を指標細胞として用いた。そしてこれらの指標細胞を刺激することにより、ヒアルロン酸(HA)、フィブロネクティン(FN)およびFBに対する指標細胞の接着にいかなる影響が及ぼされるかを詳細に検討した。その結果、マウスBリンパ球系細胞をPorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)、IL-5、Lipopolysaccharide(LPS)などのBリンパ球の増殖・分化を誘導する刺激で活性化するとこれら細胞のFN及びHAに対する接着能の誘導が認められた。しかしB細胞の初期活性化のみ惹起し得るIL-4ではいずれのECMに対する接着能も誘導しなかった。このことよりB細胞の活性化段階とECMに対する接着能の問に重要な関連性が存在することが示唆された。また、細胞接着分子特異的単クローン抗体を用いた接着阻害実験より、Bリンパ球系細胞のFN,HAに対する接着はそれぞれVLA-4,CD44分子により担われていることが確認された。興味深いことに、VLA-4分子とCD44分子が同時に活性化されることはなくreciprocalにVLA-4,CD44分子が機能するよう細胞内で制御されていることが示唆された。次に、FBに対するBリンパ球の接着に関して検討を加えたところ、Bリンパ球活性化後4時間以内は主にVLA-4分子によりそれ以降はCD44分子によりBリンパ球とFBとの接着が担われていることが示唆された。また、ヒトBリンパ球も、PMA刺激によりVLA-4およびCD44分子を介してFNおよびHAに対して接着能を示し、上述の機序によりヒトBリンパ球が歯肉線維芽細胞に接着する可能性が示唆された。

为了阐明B淋巴细胞在发炎的牙周组织中菌落和积聚的分子机制，我们分析了B淋巴细胞如何粘附到成纤维细胞（FB）的粘附能力（FB），这是Gingival的主要组成细胞之一，以及由胞外基质（BCM）产生的。根据研究计划，正常小鼠B细胞和各种克隆的B淋巴细胞肿瘤细胞被用作指示细胞。详细检查了刺激这些指标细胞对透明质酸（HA），纤连蛋白（FN）和FB粘附的粘附的影响。结果，当小鼠B淋巴细胞细胞通过刺激激活时，诱导B淋巴细胞的增殖和分化，例如Porbol 12-羟基胺13-乙酸盐（PMA），IL-5和脂多糖糖（LPS）（LPS），这些细胞对FN和HA的粘附能力进行了观察。但是，只能诱导B细胞早期激活的IL-4不会诱导任何ECM的粘附。这表明B细胞的激活阶段与ECM的粘附能力之间存在重要关系。此外，通过使用针对细胞粘附分子的单克隆抗体的粘附抑制实验，可以证实，B淋巴细胞细胞对FN和HA的粘附分别由VLA-4和CD44分子进行。有趣的是，有人提出VLA-4和CD44分子没有同时激活，并且它们被细胞内调节以在倒数中的功能。接下来，我们研究了B淋巴细胞对FB的粘附，并建议在B淋巴细胞激活后4小时内，B淋巴细胞和FB之间的粘附主要由VLA-4分子进行，此后VLA-4分子和CD44分子。人类B淋巴细胞在PMA刺激下还通过VLA-4和CD44分子具有粘附能力，这表明上述机制可能导致人类B淋巴细胞粘附到牙龈成纤维成纤维细胞上。