小児アレルギー性病態における神経因子の解明

阐明儿科过敏病理中的神经因素

• 批准号: 05770564
• 负责人: 七条 孝三郎
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770564/
• 关键词: 神経細胞; 肥満細胞; アレルギー; 神経因子

小児期に発病する各種アレルギー性疾患ではその発症機序として、肥満細胞より放出される化学物質に加えて、神経因子の関与、すなわち末梢組織における肥満細胞-神経線維終末部間のシグナル伝達物質の遊離が病態形成のひとつとして重要であると考えられている。本研究は、この経路の最初のステップッである肥満細胞-神経終末部、言い換えれば肥満細胞-神経細胞間のCell-to-Cell interactionの系をin vitroにおいて確立し、アレルギー性病態の発現に関与する神経因子の役割を解明すると同時に、このスッテプを遮断する新しい抗アレルギー剤の開発を目標とした基礎的実験を試みた。1.神経系細胞としてのヒト神経芽細胞腫株HTLA230、あるいはラット褐色細胞腫株PC12細胞を、ラット肥満細胞株RBLとともに培養した。なお培養にあたっては、両者の細胞外環境をよりin vivoのそれにより近づけるため、細胞を我われの確立したラット平滑筋細胞R_<22>Cl-Fによって産性された3次元生物学的基質上にてco-cultureした。2.co-cultureでは各細胞を10^4Cells/60mmDishの濃度で播き、かつ10%牛胎児血清を含むDMEM中で3日間培養を行うと、神経系細胞と肥満細胞とが観察に適した細胞接触を形成することがわかった。3.この条件下においては電子顕微鏡的に、両種細胞間に種々の細胞接着装置をもった形態学的細胞接触の存在が確認された。4.現在、co-cultureの神経細胞側を神経栄養因子にて活性化し、あるいは、肥満細胞側をIgE添加に続く各種抗原刺激にて活性化することにより、それぞれの細胞側に如何なるシグナルが伝達されるかを細胞内カルシウム動態を指標に検討している。

儿童时期发生的各种过敏性疾病的发病机制，除了肥大细胞释放的化学物质外，还考虑神经因素的参与，即肥大细胞与周围组织神经纤维末梢之间信号传递器的释放。为重要的发病机制之一。在这项研究中，我们在体外建立了该途径的第一步，即肥大细胞和神经末梢之间，或者换句话说，肥大细胞和神经细胞之间的细胞间相互作用系统，该系统参与过敏反应的表达。与此同时，我们进行了基础实验，旨在阐明抑制该步骤的神经因素的作用，同时开发阻断该步骤的新型抗过敏药物。 1.将人神经母细胞瘤细胞系HTLA230或大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞作为神经系统细胞与大鼠肥大细胞系RBL一起培养。为了使两种细胞的细胞外环境更接近体内环境，将细胞培养在由我们建立的大鼠平滑肌细胞R_ 22 Cl-F产生的三维生物基质上。在2.在共培养中，当每个细胞以10^4个细胞/60mm培养皿的浓度接种并在含有10%胎牛血清的DMEM中培养3天时，神经系统细胞和肥大细胞是适合观察的细胞。发现形成了接触。 3.在这些条件下，通过电子显微镜证实两种类型的细胞之间存在与各种细胞粘附装置的形态学细胞接触。 4.目前，通过与神经营养因子激活共培养的神经细胞侧，或在添加IgE后用各种抗原刺激激活肥大细胞侧，尚不清楚向各细胞侧传递什么样的信号。目前正在研究是否将细胞内钙动态用作指标。