魚類皮膚に存在する極めてユニークなスーパーオキシドディスムターゼに関する研究

鱼皮中极其独特的超氧化物歧化酶的研究

基本信息

批准号：
05760160
负责人：
中野俊樹
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.魚類皮膚スーパーオキシドジスムターゼ(SOD)の分布:ヒラメおよびギンザケ皮膚のいずれにおいてもCu,Zn型とMn型の両SOD活性が認められた。さらに興味深いことに、皮膚の中でも白色部に比べ黒色部の活性が高かった。皮膚黒色部では盛んにメラニンの合成が行われていると考えられ、そのメラニンの合成には一部活性酸素が関与していると報告されている。すなわち、皮膚においてSODは単に酸素ストレスに対する防御物質として機能するだけではなく、メラニン合成の調節因子として働いていることが示唆された。2.魚類皮膚SODの精製:(1)比較的高い活性が認められたヒラメ皮膚黒色部を用い、それより調製した粗抽出液をDEAE-Toyopearlカラムクロマトグラフィー供したところ、Cu,Zn-SOD活性は非吸着画分に、Mn-SOD活性は吸着画分にそれぞれ認められ、両酵素を良く分離することができた。さらに、非吸着画分をSuperose12HRによるFPLCで分画したところ、皮膚Cu,Zn-SODには2種のアイソマ-の存在することが明らかとなった。一般に、他生物種および組織由来のCu,Zn-SODは陰イオン交換体に吸着すると報告されており、その点皮膚SODは性質が異なっているといえる。(2)DEAE-Toyopearl後の非吸着活性画分をSP-Toyopearlカラムクロマトグラフィーに供することで両アイソマ-を分離し、その一方について電気泳動的に均一な精製酵素標品を得ることに成功した。3.精製SODの性状:一般にCu,Zn-SODは非常に耐熱性が高いとされているが、本SODは耐熱性に極めて乏しいことが明らかとなった。その他幾つかの性状も文献値と異なっており、これらの点については今後更に検討していく予定である。4.以上のように絶えず水と接し最も酸素ストレスを受けやすい組織の一つと考えられる魚類の皮膚よりSODを精製・単離し、性状について検討したのは本研究が初めてと思われる。

1。鱼皮超氧化物歧化酶（SOD）的分布：在比目鱼和鲑鱼皮中都观察到Cu，Zn和Mn SOD活性。更有趣的是，黑色部分比皮肤的白色部分更活跃。人们认为黑色素是在皮肤的黑色部分积极合成的，据报道，活性氧与黑色素的合成有关。换句话说，有人建议草皮不仅充当防御氧气应激的保护剂，而且还作为黑色素合成的调节剂。 2。鱼皮草皮的纯化：（1）使用比目鱼皮肤的黑色部分观察到相对较高的活性，从结果中制备的粗提取物进行了Deae-Toyopearl柱色谱法，并且在非吸附级分和MN-SOD活性中观察到Cu和Zn-Sod活性在良好的良好的范围内，允许且允许的fractions允许。此外，当使用Superose12hr通过FPLC分割非吸附的馏分时，揭示了皮肤Cu和Zn-Sod中存在两种类型的异构体。通常，已将来自其他生物体和组织的Cu，Zn-Sods据报道，吸附到阴离子交换器上，可以说皮肤草皮在其性质上有所不同。（2）在DEAE-ToyopeApearl之后，通过spoyopearl柱色谱法分离了两个异构体，并获得了电泳均匀纯化的酶制备。 3。纯化的SOD的性质：尽管通常认为Cu和Zn-Sod具有极高的耐热性，但已经发现该SOD的耐热性极差。其他几个属性与文献价值观不同，将来将进一步考虑这些点。 4。这项研究似乎是SOD首次从鱼皮中纯化和分离出来，这被认为是不断暴露于水的组织之一，并且最容易受到氧气的影响，并检查了其特性。