V(D)Jリコンビネース欠損突然変異を用いたDNA修復機序の解析

使用 V(D)J 重组缺陷突变分析 DNA 修复机制

• 批准号: 04152094
• 负责人: 小松 賢志
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152094/
• 关键词: scidマウス; アタキシアーテランジェクタシア; 遺伝子マッピング

V(D)Jリコンビネース欠損のマウス重症複合免疫不全症scidはDNA修復能力の欠陥が原因で電離放射線高感受性をある。本研究は放射線高感受性を指標としたscid遺伝子のマッピング,クローニングがそしてその生物学的特性の解明を目的として次のことが明らかとなった。1.生物学的特性:scid突然変異と同様に放射線高感受性を示すヒト遺伝病Ataxia-telangiectasiaは同時にDNA合成に関しても放射線低抗性である。しかし、scidをDNA合成に関する放射線感受性は正常であるので、両突然変異は修復機序に差異があると思われる。2.scidの原因染色体:マウスとヒト体細胞融合Hybridではヒト染色体が選択的に脱落することを利用して、scid突然変異を相補するヒト染色体を8番に同定した。3.scid遺伝子のマッピング:放射線ハイブリッド法を用いてヒト8番染色体特定領域にscid遺伝子をマッピングした。4.scid遺伝子クローニングの試み:上記放射線ハイブリッド細胞から8番染色体特定領域のコスミドライブラリーを作製した。scid遺伝子を特定した8番染色体領域は0.4〜0.8Mbと狭く、これはコスミドクローンのわずか10〜20個分に相当する。現在この領域から調製されたコスミドクローンをscid細胞にトランスフェクションしてscid遺伝子を含むコスミドクローンの同定を行っている。scid遺伝子は放射線あるいはV(D)Jリコンビネーションによって開裂したDNA新片をつなぎとめる役割をしていると言われている。我々の遺伝子クローニングは修復機序の解明に貢献すると思われる。

SCID是一种具有V（d）J重组缺乏的严重组合免疫缺陷小鼠，由于DNA修复能力缺陷而对电离辐射高度敏感。这项研究揭示了以下内容，目的是使用放射敏感性作为指标对SCID基因进行映射和克隆，并阐明其生物学特性。 1。生物学特性：thaxia-telangiectia是一种对辐射高度敏感的人类遗传疾病，同时也是DNA合成中抗辐射较低的。但是，由于SCIDS对DNA合成的辐射敏感性正常，因此两个突变似乎在修复机制上有所不同。 2。用于SCID的致病染色体：使用人类和人类体细胞融合混合动力中人类染色体的选择性损失用于鉴定人类染色体，这些染色体补充了SCID突变的数字8。SCID基因的映射：SCID基因的映射：使用辐射杂交方法将SCID基因映射到人类8特异性染色体区域。 4。试图克隆SCID基因：由上述的宽松细胞制备了具有8个特定区域的宇宙文库。鉴定出SCID基因的染色体区域8在0.4-0.8 MB处狭窄，仅对应于10-20个宇宙克隆。当前，从该区域制备的宇宙克隆被转染到SCID细胞中，以鉴定含有SCID基因的宇宙克隆。据说SCID基因在连接被辐射或V（d）J重组裂解的新DNA片段中发挥了作用。我们的基因克隆似乎有助于阐明修复机理。

项目成果

M.Itoh: "Human chromosowe 8(p12-q22)crmplements radiosensitivity in severe combined imnwnodeficiency(SCID)mouse" Radiation Research. (1993)

M.Itoh：“人类染色体 8(p12-q22)crmplements 放射敏感性在严重联合免疫缺陷 (SCID) 小鼠中”辐射研究。

K.Komatsu: "Dose rate effects of neutrons and r-raus on the induction of mutation and oncogenic transformation" International Journal of Raciation Biology. (1993)

K.Komatsu：“中子和 r-raus 对突变和致癌转化诱导的剂量率影响”国际种族生物学杂志。

小松 賢志: "ルイボスティーの放射線発がん抑制効果" 長崎医学会雑誌. (1993)

Kenji Komatsu：“Rooibos 茶抑制辐射致癌作用”，长崎医学会杂志（1993 年）。

K.Komatsu: "Murine scid cells complement ataxia-telangiectasi a cells and show abnormal post-irradiation response DNA synthesis" International Journal of Radiation Biology. (1993)

K.Komatsu：“小鼠 scid 细胞补充共济失调毛细血管扩张细胞，并显示异常的辐射后反应 DNA 合成”国际放射生物学杂志。

K.Komatsu: "Low dose irradiation and biological defense mechanisins" Elsevier Science Publishers,Amsterdam, 4 (1992)

K.Komatsu：“低剂量照射和生物防御机制”Elsevier Science Publishers，阿姆斯特丹，4 (1992)