細胞育種と細胞融合

细胞育种和细胞融合

基本信息

批准号：
60125005
负责人：
山田康之
金额：
$ 16.38万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究班は以下の点について成果をあげることができた。(1)細胞レベルにおける遺伝特性の解析と選抜に関する研究西はニンジン細胞を変異原処理し、色素含量の異なる多数の細胞株を得た。また選抜細胞間の融合を試み、細胞の遺伝的背景について検討した。児玉はタバコなどの細胞培養濾液中に細胞分列を促進する物質があることを見出し、精製して比較的低分子の熱に安定な活性因子を得た。田中はハプロパプスの苗条原基をコルヒチンで処理すると、四倍性細胞が高頻度で出現すること、またこの細胞から四倍体植物や混数性植物体が得られることを示した。小林は核分列に異常をもたらす物質に注目し、アルファルファのカルス化、カルスの増殖、再分化におけるコルヒチンの効果を調べた。千田はプロトプラスト表層の性質を細胞電気泳動法などで調べた。また誘電泳動焦点法による電気融合法開発の基礎的研究を行った。駒嶺はニンジン細胞を用い、単細胞が不定胚を形成する条件を調べ、不定胚分化が始まる初期段階の細胞学的変化や核酸の合成活性を調べた。(2)細胞融合、核注入などによる雑種細胞育成に関する研究山田はマイクロインジェクションの装置を開発し、細胞内の核へ外来のDNAを直接導入する試みに成功した。古沢はプリッキング法で効率よくウィルスDNAをプロトプラスト内へ注入することに成功した。またマイクロインジエクション法の開発も試みた。竹内はイネ科作物の継代培養細胞および芽生えの葉よりプロトプラストを分離し、細胞融合の条件を検討した。足立は突然変異の遺伝子に注目し、その相補性を利用して、雑種細胞を選別することを試みた。また異属間のプロトプラスト融合、培養も試みた。小野は苔類の半数体細胞、シャクヤクの花粒由来の半数体細胞を用い、各種の耐性株を作出して、雑種の選別に用いる可能性を検討した。

该研究小组在以下几点上取得了成果。 (1)细胞水平遗传特性的分析和选择研究 Nishi用诱变剂处理胡萝卜细胞，获得了多种不同色素含量的细胞系。我们还尝试了选定细胞之间的融合并研究了细胞的遗传背景。小玉发现烟草等植物的细胞培养滤液中存在一种促进细胞分裂的物质，并将其纯化得到相对低分子量、热稳定的活性因子。田中表明，当用秋水仙碱处理单瓣草的茎原基时，四倍体细胞出现的频率很高，并且可以从这些细胞中获得四倍体和混合植物。小林重点关注导致核分割异常的物质，研究了秋水仙碱对苜蓿愈伤组织形成、愈伤组织增殖和再分化的影响。 Senda 使用细胞电泳和其他方法研究了原生质体表面层的特性。我们还对使用介电泳聚焦的电融合方法的发展进行了基础研究。 Komamine利用胡萝卜细胞研究了单细胞形成体细胞胚胎的条件，并检查了体细胞胚胎分化早期阶段的细胞学变化和核酸合成活性。 (2)通过细胞融合、核注射等方式进行杂交细胞生长的研究。山田开发了显微注射装置，成功地尝试将外源DNA直接引入细胞内的细胞核中。古泽成功地利用穿刺法将病毒DNA有效地注入原生质体中。我们还尝试开发一种显微注射方法。竹内从传代培养的细胞和草类作物的发芽叶子中分离出原生质体，并检查了细胞融合的条件。安达专注于突变基因，并试图利用它们的互补性来选择杂交细胞。我们还尝试了不同属之间的原生质体融合和培养。小野使用来自苔类的单倍体细胞和来自牡丹花籽的单倍体细胞来创建各种抗性菌株，并研究了将它们用于杂交选择的可能性。