EBウイルス活性化を抑制する天然物質とその抗プロモーター作用に関する研究

抑制EB病毒激活的天然物质及其抗启动子作用的研究

基本信息

批准号：
60015034
负责人：
小清水弘一
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

プロモーション過程が発がんの場に於いて極めて重要であり、またその機構が複雑であることが明らかにされつつある現在、本研究者等は、臨床的な意味は勿論、その機構解明のためにも新しい抗プロモーターの開発が必要であるとの見地から、次の研究を行ってきた。天然抗プロモーターの短期検出法として、Epstein-Barrウイルス(EBV)活性化抑制試験法-EBVゲノムを保持したRaji細胞を用い、TPAに誘起される本ウイルス活性化の、被検物質による抑制率を測定する-を用いた。先ず、強力なプロモーターは炎症作用を合わせ持つ事実から、抗炎症性植物に着目し、これらのEBV活性化抑制作用を調べた。その結果、カキドオシ(Glechoma hederaceae)に強い活性が認められた。本抑制活性を指標に活性体を分離精製し、ウルソール酸(UA)及びオレアノール酸(OA)を単離同定した。両者の抑制活性は既知の抗プロモーター、レチノール酸(RA)のそれと同程度であった。しかしながら、UA,OAに関し特徴的であったことは、これら両者のRaji細胞に対する毒性がRAのそれに比しはるかに低い事実であった。UA,OAはin vivo発がん二段階試験で、RAと比肩し得る抗プロモーション活性を示した。興味あることに UAはイニシエーション一週後唯一度の処理で、充分抗プロモーターとしての効果が認められた。以上の実験で、EBV活性化抑制作用が抗プロモーション活性と良く対応することがわかったので、多くの植物、微生物抽出物についてEBV活性化抑制作用をスクリーニングしてみた。それぞれ400種について検討した結果、植物では60種と巾広く活性が認められた。一方微生物については2種のみが活性であった。現在、さらに多くの植物、微生物についてスクリーニングを進めると共に、上記活性植物より活性体の精製単離を続行中である。

现在人们已经清楚，促进过程在癌发生中极其重要，而且其机制也很复杂，因此本研究人员和其他人对研究感兴趣不仅是因为其临床意义，而且是为了阐明其机制。为了开发新的反启动子，我们进行了以下研究。作为天然抗启动子的短期检测方法，我们采用EB病毒（EBV）激活抑制试验方法——携带EBV基因组的Raji细胞，通过试验评估TPA诱导的该病毒激活的抑制率用于测量 - 被使用。首先，由于强启动子也具有炎症作用，因此我们将重点放在抗炎植物上，并研究了它们对 EBV 激活的抑制作用。结果，在常春花科中观察到强烈的活性。以该抑制活性为指标，分离纯化活性体，分离鉴定熊果酸（UA）和齐墩果酸（OA）。两者的抑制活性与已知的抗启动子视黄酸（RA）相当。然而，UA和OA的独特之处在于它们对Raji细胞的毒性远低于RA。在两阶段体内致癌性测试中，UA 和 OA 表现出与 RA 相当的抗促癌活性。有趣的是，当仅在开始后一周治疗一次时，UA 作为抗启动子就足够有效。在上述实验中，发现EBV激活抑制作用与抗促进活性很好地对应，因此我们筛选了许多植物和微生物提取物的EBV激活抑制作用。对每个物种的 400 个物种进行了检查，结果在 60 个物种中发现了广泛的活性。另一方面，只有两种微生物具有活性。目前，我们正在进行更多植物和微生物的筛选，并继续从上述活性植物中纯化分离活性形态。