「PSのクオリティ」に着目したPS合成酵素の機能解明

以“PS质量”为中心的PS合成酶功能阐明

基本信息

批准号：
22KJ0530
负责人：
近江純平
金额：
$ 3.08万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ0530/
关键词：
ホスファチジルセリン脂肪酸分子種 PSS1 PSS2 血球免疫細胞 LMS

项目摘要

リン脂質の１種であるホスファチジルセリン（PS）の合成酵素PSS1とPSS2が産生するPS脂肪酸分子種の生物学的意義に着目した解析を進めている。令和4年度にはゲノム編集技術により作出したPSS1とPSS2の欠損マウスのリン脂質測定を実施し、各酵素が生体内で支配的に産生するPS分子種を解析した。その結果として、主にC32:0、C34:0、C34:1、C36:1、C36:2、ならびにC38:4を脂肪酸鎖として有するPS分子種を PSS1支配型、C38:6、C40:6、ならびにC40:7を脂肪酸鎖として有するPS分子種をPSS2支配型として定義した。このようなPSS1支配型/PSS2支配型のPS脂肪酸分子種分布が実際に生体内に存在するかを明らかにする目的で、一例として血球系細胞に着目し、造血幹細胞から末梢血球までの血球系細胞のリン脂質組成を解析した。その結果、確かにある種の血球系細胞ではPSS1支配型PSを、また別種の血球系細胞ではPSS2支配型PSを豊富に有することを見出している。2023年度においてはこれらの血球系細胞に着目し、PS分子種バランスの個体レベルでの重要性を明らかにする予定である。また、令和4年度には、過剰活性化変異体PSS1のROSA26領域ノックインマウスの樹立に成功した。当該ノックインアリルを持つマウスではCre存在下で変異体PSS1が発現する。本マウスを全身性にタモキシフェン依存的に全身性にCreを発現するマウスと交配し、得られた産仔を用いて発現誘導実験を実施した。その結果、タモキシフェン投与により本酵素の発現を誘導すると、諸臓器のうち特に骨格筋と心臓において、PSS1支配型PS分子種の増加と共にPSS2支配型PS分子種の減少が見られた。2023年度では本マウスの表現型解析を進めると共に、本マウスをツールとして、前述の血球系細胞の解析にも応用する。

我们目前正在进行一项分析，重点介绍了由合成酶PSS1和PSS2产生的磷脂，磷脂酰辛碱（PS）产生的分子PS脂肪酸的生物学意义，这是一种磷脂。在2022年，对缺乏PSS1和PSS2的小鼠进行了磷脂测量，这些小鼠是使用基因组编辑技术产生的，而每种酶在体内产生显着的PS分子物种。结果，主要具有C32：0，C34：0，C34：1，C36：1，C36：2和C38：4的PS分子物种定义为PSS1控制的形式，C38：6，C40：6，C40：6，C40：6，和C40：7：AS fatty Acid Acid Acid Acid Acid Acid As Fatty Acid As fatty As fat As fatty As af Fatty Acted pecs pecs pecs pecs 2-constroll sentect pect pect opent opent opent opent opent opent opent opent opent opent opent opents2-controll peconloll。为了澄清PSS1主导/PSS2主导类型中PS脂肪酸分子物种的分布实际上是否存在于体内，我们以血细胞为例，并分析了血细胞从血肿的血细胞中血细胞的磷脂组成，以使血细胞从血液细胞中进行周围血细胞。结果，已经发现某些血细胞基细胞具有丰富的PSS1主导的PS，而其他血细胞基细胞具有丰富的PSS2主导的PS。在2023财年，我们计划专注于这些血细胞系，并阐明PS分子物种在单个水平上平衡的重要性。此外，在2022年，我们成功地建立了多活化突变体PSS1 ROSA26区域的敲入小鼠。在携带敲入等位基因的小鼠中，突变体PSS1在CRE存在下表达。该小鼠是用小鼠以他莫昔芬依赖性方式系统地在系统上表达的小鼠，并使用所得犊牛进行了表达诱导实验。结果，当他莫昔芬给药诱导该酶的表达时，PSS1控制的PS分子物种的数量随着PSS2控制的PS分子物种的增加而降低，尤其是在骨骼肌和心脏中。在2023年，将对该小鼠进行表型分析，并将使用该小鼠作为工具应用于上述血细胞系的分析。