遺伝性ニューロバチーの遺伝子診断法の確立

遗传性神经病基因诊断方法的建立

• 批准号: 09557063
• 负责人: 早坂 清
• 金额: $ 7.81万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09557063/
• 关键词: 遺伝性ニューロパチー; シャルコーマリーツース病; ミエリン; 遺伝子診断; シャルコ-マリ-ツース病; Charcot-Marie-Tooth病; Charcot-Marie-Tooth病1型; PeripheralMyelin Protein 22; P0蛋白; Connexin32

Charcot-Marie-Tooth病は2500人に一人と最も頻度が高い遺伝性ニューロパチーである。欧米の報告では、1型の8割の症例に染色体17p11.2-p12の遺伝子重複が検出され、重複の認められない症例ではPeripheral Myelin Protein22(PMP22)、Po蛋白、Connexin32(Cx32)の遺伝子変異が確認されている。遺伝子重複の検出が遺伝子診断の第一歩であり、遺伝子重複の反復配列位置するプローブを利用してサザンブロットハイブリダイゼーションを行い、放射活性をイメージアナライザーで計測するという簡便で確実な診断法を確立した。次に、CMT1Aの遺伝子重複の認められない症例に対し、PMP22、Po蛋白、Cx32の遺伝子変異についてスクリーニングするSingle Strand Conformational Polymorphism(SSCP)法を確立した。国内各地から依頼のあったCMT病関連疾患128家系を解析した。結果は染色体17p11.2-p12の遺伝子重複25家系、17p11.2-p12の遺伝子欠失6家系、PMP22遺伝子変異2家系、Po蛋白遺伝子変異4家計、Cx32遺伝子変異9家系を検出した。遺伝子重複は欧米と異なり、本邦では約20%の症例にしか検出されなかった。また、検出されたPMP22、Po蛋白、Cx32の遺伝子変異の殆どは未報告の遺伝子変異であった。更に、原因の同定出来ない症例に対しては、新たな病因候補遺伝子としてミエリン会合性糖蛋白質の遺伝子変異の有無について検索したが、変異は確認されなかった。この遺伝子は遺伝性ニューロパチーの病因となりうる可能性は低いと思われた。日本人では遺伝子重複の症例は少なく、民族の特異性の伺われ、また、病因遺伝子が同定されない症例が多く、新たな病因遺伝子の解明が求められる。

charcot-marie-tooth病是最常见的遗传神经病，有2500人。根据西方的报道，已经检测到了17p11.2-P12染色体的基因重复，并且已经检测到了基因复制，并且在未观察到重复的情况下，在未确认的情况下已经确认了周围髓蛋白蛋白22（PMP22），PO蛋白和coxin32（CX32）的遗传突变。基因重复的检测是遗传诊断的第一步，并使用探针确定了一种简单可靠的诊断方法，其中基因重复位置以执行Southern印迹杂交，并使用图像分析仪测量放射性。接下来，在未观察到CMT1A基因重复的情况下，建立了一种单链构象多态性（SSCP）方法，以筛选PMP22，PO蛋白和CX32基因突变。我们分析了全国各地要求的128个与CMT疾病有关的疾病。结果检测到染色体17p11.2-P12的25个基因重复，在17p11.2-P12上的6个基因缺失，2 pmp22突变，4个PO蛋白突变和9个Cx32突变。与欧洲和美国不同，在日本仅20％的病例中发现了基因重复。此外，PMP22，PO蛋白和CX32中检测到的大多数基因突变是未报告的基因突变。此外，对于无法识别原因的情况，髓磷脂相关糖蛋白作为发病机理的新候选基因的存在或不存在，但没有证实突变。看来该基因可能是遗传神经病的发病机理。日本人中很少有基因重复的病例，表明种族的特异性尚未确定，因此有必要阐明新的病因学基因。

项目成果

Yamamoto M 他: "Clustering of CMT 1A duplication breakpoints in a 700 bp interval of CMT 1A-REP determined by polymerase chain reaction" Human Mutation. 11・2. 109-113 (1998)

Yamamoto M 等人：“聚合酶链式反应测定的 CMT 1A-REP 700 bp 间隔中的 CMT 1A 重复断点的聚类”11・2（1998 年）。

Ikegami K 他: "A novel mutation of the myelin Po gene in a pedigree with Charcot-Marie-Tooth disease" Am.J.Med.Genet.71・2. 246-248 (1997)

Ikegami K 等：“腓骨肌萎缩症家系中髓磷脂 Po 基因的新突变”Am.J.Med.Genet.71·2 (1997)。

Ikegami K 他: "A novel mutation of the myelin Po gene in a pedigree with Charcot-Marie-Tooth disease"Am.J.Med.Genet.

Ikegami K 等人：“腓骨肌萎缩症家系中髓磷脂 Po 基因的一种新突变”Am.J.Med.Genet。

Yamamoto M 他: "Location of crossover breakpoints within the CMT1A-REP repeat in Japanese patients with CMT1A and HNPP"Hum.Genet.

Yamamoto M 等人：“日本 CMT1A 和 HNPP 患者 CMT1A-REP 重复中交叉断点的位置”Hum.Genet。

Yamamoto M., et al.: "Location of crossover breakpoints within the CMTIA-REP repeat in Japanese pati-ents with CMTIA and HNPP." Hum. Genet.99巻. 151-154 (1997)

Yamamoto M. 等人：“日本 CMTIA 和 HNPP 患者中 CMTIA-REP 重复的交叉断点位置”，第 99 卷，151-154（1997 年）。