Ca^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼの発現局在に関する形態学的研究

Ca^2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶表达定位的形态学研究

基本信息

批准号：
08770002
负责人：
阪上洋行
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Ca^<2+>シグナル伝達機構に深く関与するCa^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼ(CaMキナーゼ)の神経細胞における分子多様性を持つ生理的意義を解明すべく、CaMキナーゼのタンパク及び遺伝子発現の局在を免疫組織化学的及びin situハイブリダイゼーション法を用いて形態学的に検討した。CaMキナーゼIVに関しては、我々は既にCaMキナーゼIVのβ亜型の一次構造と遺伝子発現局在を解明し、さらに特異的抗体の作製に成功し、本酵素が、小脳、大脳、海馬などの中脳神経系の神経細胞のみならず、上頚神経節、顎下神経節、副腎髄質細胞、三叉神経節及び脊髄神経節などの末梢神経系の神経細胞においても発現することを明らかにしてきた。本年度はさらに網膜において、本酵素が、双極神経細胞と神経節細胞に特異的に発現することを二重標識法を用いた免疫組織化学法及び遺伝子組織化学法により証明した。また、脊髄神経節における本酵素の発現神経細胞を、神経ペプチドとの関連に着目して詳細に検討した結果、GGRP陽性細胞の1/4に、また、大部分のソマトスタチン陽性細胞と共存して発現していることを明らかにし、これらの神経ペプチドとの関連が明らかにした。さらに近年、CaMキナーゼIVの活性化因子として見出されたCaMキナーゼキナーゼの遺伝子発現の分布をin situハイブリダイゼーション法を用いて検討した。その結果、CaMキナーゼキナーゼの遺伝子発現は成熟期中枢神経系において広く分布し、特に臭球、海馬と大脳皮質において強い発現が認められた。しかしながら、CaMキナーゼIVの豊富に発現している小脳での発現は微弱なものであり、また、CaMキナーゼIVの発現の認められない脳領域においてもCaMキナーゼキナーゼの発現が認められることより、CaMキナーゼキナーゼがCaMキナーゼIVの活性化調節以外の機能に関与することやサブタイプが存在する可能性が示唆された。以上、申請した実験計画に従い、CaMキナーゼの分子多様性の神経細胞における生理的意義を形態学的に着実に追及しつつある。

Ca^<2+> CAM激酶的蛋白质阐明了CAM^<2+>/钙调蛋白 - 依赖性卵蛋白酶（CAM激酶）的神经细胞中分子多样性的生理意义（CAM激酶）。和原位杂交方法。关于CAM激酶IV，我们已经阐明了CAM激酶IVβ -ashin的主要结构和基因的定位，并成功地产生了一种特定的抗体，并且该酶在核心，大脑，海马等中。不仅在神经神经系统的神经性细胞中揭示，而且在周围神经性细胞（例如神经剂节点，下巴的下神，肾上腺索细胞，三叉神经节和脊髓神淋巴结）等周围神经性细胞中也被揭示。在这个财政年度，免疫组织法和遗传组织法进一步证明了视网膜，该酶在双极神经细胞和神经体细胞中特异性表达。此外，由于在与神经肽的关系中详细介绍了该酶的神经细胞，因此与三分之一的GGRP阳性细胞和大多数STATIN阳性细胞共存被揭示了它是表达的，并揭示了与这些神经肽的关系。此外，近年来，使用原位杂交方法检查了CAM激酶激酶的GenZO表达的分布，该分布被发现是CAM激酶IV的激活因子。结果，CAM激酶激酶基因表达被广泛分布在成熟的中枢神经系统中，尤其是在气味，海马和脑皮质中识别出强表达。然而，在CAM激酶IV中丰富的小脑中的表达是弱的，并且在CAM激酶IV的表达中识别出CAM激酶激酶的表达被识别。除了CAM激酶IV的激活调整以外的功能，并且有一个亚型。根据应用实验计划，CAM激酶在分子多样性中的生理意义正在正式地稳步追求。