鎖交換反応を介したDNA損傷トレランス機構の解析

链交换反应介导的DNA损伤耐受机制分析

基本信息

批准号：
22KJ3157
负责人：
松尾(楠本) 理加
金额：
$ 2.58万
依托单位：
National Cancer Center Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ3157/
关键词：
UV 不死化ゲノム不安定性 DNA二本鎖切断紫外線

项目摘要

紫外線C波（UV-C）が細胞の不死化に与える影響を明らかにすることを目的としている。マウス胎仔線維芽細胞(MEF)は分裂を繰り返すとそのほとんどは分裂を停止するが、一部はゲノム不安定性とARF/p53変異を伴ってやがて不死化する（ここでは自然不死化と呼ぶ）。不死化の過程ではDNA複製に起因したDNA二本鎖切断が蓄積している。前年度は継代回数3回のprimary MEFにUV-Cを照射すると、非照射細胞に比べて不死化が早まることと、UV-C照射後にもDNA複製に起因したDNA二本鎖切断が蓄積していることを示した。今年度はUV-C照射後の不死化メカニズムを明らかにするために、UV-C照射後に不死化したMEF、自然不死化したMEF、primary MEFの3種類の全ゲノム配列解析を実施した。現在詳細な解析を行なっている。また、当グループではγ線により誘導されるDNA切断やヘテロクロマチン生成を指標に、これらを抑える効果の高い低分子化合物をスクリーニングにより同定し、その混合物をゲノムスタビライザーとして用いている。ゲノムスタビライザーを含む培地でMEFを培養すると、MEFの自然不死化を抑制することを示している。そこで、UV-C照射による不死化へ与える影響も調べたところ、ゲノムスタビライザーはUV-C照射後の不死化を抑制した。ゲノムスタビライザーがUV-C照射後に蓄積するDNA二本鎖切断を抑制するかどうかを現在調べている。

目的是阐明紫外线 C (UV-C) 辐射对细胞永生化的影响。小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）经过反复分裂后，大多数停止分裂，但有些最终由于基因组不稳定和ARF/p53突变而变得永生化（此处称为自发永生化）。在永生化过程中，DNA复制引起的DNA双链断裂不断积累。去年，经过 3 次传代的原代 MEF 的 UV-C 照射比未照射的细胞具有更快的永生化速度，并且即使在 UV-C 照射后，DNA 复制引起的 DNA 双链断裂也会累积。我正在做。今年，为了阐明UV-C照射后的永生化机制，我们对三种类型的MEF进行了全基因组序列分析：UV-C照射后永生化的MEF、自然永生化的MEF和原代MEF。目前正在进行详细分析。此外，我们的研究小组还通过筛选鉴定出对抑制伽玛射线引起的DNA断裂和异染色质形成非常有效的低分子量化合物，并将该混合物用作基因组稳定剂。我们发现，在含有基因组稳定剂的培养基中培养 MEF 会抑制 MEF 的自然永生化。因此，我们研究了UV-C照射对永生化的影响，发现基因组稳定剂抑制了UV-C照射后的永生化。我们目前正在研究基因组稳定剂是否能抑制 UV-C 照射后累积的 DNA 双链断裂。