MSMDの新規責任遺伝子同定と多発性骨髄炎発症に関与する分子病態解析

鉴定导致 MSMD 的新基因以及参与多发性骨髓炎发生的分子病理学分析

• 批准号: 15K19617
• 负责人: 平田 修
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15K19617/
• 关键词: MSMD; 多発性骨髄炎

本研究課題では、MSMD（mendelian susceptibility to mycobacterial diseases）患者を対象に既知の責任遺伝子群の解析、次世代シーケンサーを用いたエクソーム配列解析による新規責任遺伝子の同定、慢性再発性多発性骨髄炎（CRMO）患者を対象にMSMDの責任遺伝子群の解析を試みたが、研究期間の短縮のため、多発性骨髄炎を認めるMSMDの１家系５症例において、STAT1新規遺伝子変異（G250E）を同定できたのみであった。本変異は慢性皮膚粘膜カンジダ症（CMCD）をフェノタイプとする症例で報告が多いCoiled Coilドメインに変異を認めていたが、これまでに報告されているMSMD-STAT1異常症と同様にIFN-γ刺激に対するGAS転写活性の優性阻害効果を認めた。本症例では病変部よりBCGが検出されており、GAS転写活性の障害による細胞内寄生菌（マイコバクテリウムやBCG）への易感染性が示唆された。MSMD患者における多発性骨髄炎の病態解析に関しては、これまでに当院で同定しているMSMD患者（STAT1異常症、IFNGR1異常症）の末梢血より分離したCD14陽性細胞を用いて、破骨細胞への分化を確認した。IFN-γ存在下で、正常検体では破骨細胞の分化が抑制されたが、患者検体ではIFN-γ存在下でも破骨細胞の分化は抑制されず、IFN-γシグナル伝達障害による破骨細胞の活性化が示唆された。

在本研究主题中，我们试图分析孟德尔对分枝杆菌疾病易感性（MSMD）患者中已知的负责基因组，使用下一代测序仪通过外显子组序列分析来鉴定新的负责基因，并分析患有慢性重复进行多层骨膜炎（CRMO）患者的MSMD负责任基因组。但是，为了缩短研究期，我们能够在五个患有多结肌炎的MSMD病例中鉴定出新的STAT1基因突变（G250E）。该突变是在盘绕的线圈结构域中发现的，在患有慢性粘膜念珠菌病（CMCD）的病例中经常报道，但与先前报道的MSMD-STAT1异常相似，它显示出气体转录活性对IFN-γ刺激的主要抑制作用。在这种情况下，在病变中检测到BCG，这表明由于气体转录活性受损而易受细胞内寄生虫（分枝杆菌和BCG）的影响。关于MSMD患者的多结膜炎的病理分析，使用从MSMD患者的外周血（STAT1功能障碍，IFNGR1功能障碍）在我们医院鉴定出的CD14阳性细胞（STAT1功能障碍，IFNGR1功能障碍）确认为破骨细胞的分化。在IFN-γ存在下，在正常样品中抑制了破骨细胞分化，但是在患者标本中，即使在IFN-γ存在下，破骨细胞分化也不会抑制，这表明由于IFN-γ信号障碍而导致的骨细胞激活。