Molecular dissection of bone pain using a mouse model for autoinflammatory disease

使用自身炎症性疾病小鼠模型对骨痛进行分子解剖

基本信息

批准号：
21K05991
负责人：
阿部幸一郎
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

自己炎症性骨疾患のひとつである慢性再発性多発性骨髄炎（CRMOと略す）は、自然免疫系が関与する炎症によって骨髄炎を発症し、骨痛や骨破壊の病変によって診断される。CRMOの発症原因については未知な点が多く、また主な症状である骨痛や骨破壊のメカニズムについてもほとんどわかっていない。我々は自己炎症性骨疾患モデルであるAli18変異マウスの原因遺伝子とCRMO患者のバリアントに共通して、SrcファミリーのFgr遺伝子の突然変異を見出した。Ali18マウスでは、Fgrの機能亢進型のミスセンス変異が原因となって、炎症による四肢抹消の破壊、骨髄炎、長骨の骨密度低下などの自己炎症疾患様の表現型が認められた。しかしCRMOの主症状である骨痛については、よくわかっていない。Ali18マウスを用いて種々の疼痛試験をパイロット的に行ったところ、機械性非侵害性刺激に対して過敏となる異痛症（アロディニア）であることが示された。そこで本研究において解析するマウスの数を増やし、また、Ali18マウスの四肢抹消の自己炎症を減弱させることがわかっているキナーゼ阻害剤であるダサチニブを投与した群と比較して疼痛試験を行った。その結果、Ali18マウスでは有意に刺激に対して過反応を起こしていることがわかった。それに比較してダサチニブ投与群では自己炎症が減弱し、野生型と同程度の反応であった。現在、陰性対照となる野生型マウスの疼痛試験のサンプル数が十分でないので、交配を行って準備している。また、Fgrレポーターマウスは継代して順調に数が増えてきたので、現在、組織切片を開始して免疫組織染色のセッティングを行っている。さらに、先端モデル動物支援プラットフォームに応募して採択されたので、Ali18と同じ変異を持つラット系統をゲノム編集によって作製しているところである。

慢性复发性多结膜炎（作为CRMO缩写为CRMO）是一种自发性骨疾病之一，由于涉及先天性免疫系统的炎症引起的骨髓炎，并通过骨痛和骨骼止痛病的病变来诊断。关于CRMO的原因，有许多未知数，关于骨痛和骨骼破坏的机制几乎没有知识，这是主要症状。我们发现在SRC家族的FGR基因家族中，与Ali18突变小鼠的致病基因，一种自发性骨骼疾病模型和CRMO患者的变体共同。在ALI18小鼠中，FGR中的过度功能性错义突变导致自炎性疾病样的表型，例如由于炎症，骨髓炎和长骨的骨密度降低而导致的外周肢体破坏。但是，骨痛是CRMO的主要症状，尚不清楚。使用ALI18小鼠进行了各种疼痛测试，并表明异常性痛是对机械非伤害性刺激的过敏性。因此，在这项研究中要分析的小鼠数量增加了，与施用的dasatinib相比，dasatinib是一种已知的激酶抑制剂，该激酶抑制剂已知可减弱ALI18小鼠外围肢体自身炎症。结果表明，ALI18小鼠显着反应到刺激。相比之下，达沙替尼组的自身炎症减少了，与野生型相似。当前，阴性对照野生型小鼠的疼痛测试样品数量还不够，因此正在进行交配以准备。此外，由于通过FGR报告的小鼠的数量在通过后稳定增加，因此现在开始进行组织切片以进行免疫组织化学染色。此外，由于它被应用于先进的模型动物支撑平台并被选中，因此目前正在通过基因组编辑生产，以创建与ALI18相同突变的大鼠菌株。