糖鎖認識ユビキチンリガーゼによる分泌系タンパク質の品質管理機構の解明

通过糖链识别泛素连接酶阐明分泌蛋白的质量控制机制

基本信息

批准号：
15032264
负责人：
吉田雪子
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、糖鎖を認識するユビキチンリガーゼ「SCF(Fbs1)とそのファミリー分子群」の構造と機能をさまざまな角度から明らかにすると共に、その生理的意義について分子レベルから個体レベルで解明し、「タンパク質の一生」の領域における品質管理の新たな一面を明らかにすることを目的として進めた。昨年度は(1)Fbs1の標的分子の同定とクローニング、(2)Fbs1相同遺伝子の解析、(3)Fbs1の構造解析について既に終了している。今年度は、以下の項目について研究を遂行した。(1)Fbs1標的分子の挙動解析Fbx2との結合性及び糖鎖構造を解析する。この成果はEMBO.Reportsに報告し受理されている。また、標的分子の細胞内における存在部位などをGFP融合蛋白質として発現させることで可視化し、Fbx2の細胞内における機能の全体像を明らかにすることについては現在進行中である。(2)Fbs1の糖鎖結合部位の特定構造解析より得られた情報を元にFbs1に変異を導入し、結合部位を特定すると共に結合様式の推定を行う。この成果についてはNature Struct.Mol.Biol.に報告した。(3)SCF(Fbs1)ユビキチンリガーゼと複合体を形成する分子の解析結合特異性、互いの結合に責任のある領域の同定については終了したが、その生物学的意義について現在解析を進めているところである。(4)Fbs1及び相同遺伝子のノックアウトマウスの作製作製は終了し現在解析中である。

这项研究旨在阐明泛素连接酶“ SCF（FBS1）及其家庭分子”的结构和功能，从各个角度识别聚糖，并阐明其人体从分子水平到个体水平到个体水平的生理意义，并阐明蛋白质的质量控制的新质量控制。”去年，我们已经完成（1）鉴定和克隆FBS1靶标分子，（2）FBS1同源基因的分析以及（3）FBS1的结构分析。今年，我们对以下项目进行了研究：（1）FBS1目标分子的行为分析分析了用FBX2分析结合特性和聚糖结构。据报道，该结果已向EMBO.RETORTS进行了报道并收到。此外，目前存在着一个持续的过程，可以通过将其表达为GFP融合蛋白，并阐明细胞中FBX2功能在细胞中的总体外观，从而可视化细胞内目标分子的位点。（2）基于从FBS1的聚糖结合位点的特定结构分析获得的信息，将突变引入FBS1，并确定结合位点并估算结合模式。该结果已报告给自然结构。mol.biol。（3）分析与SCF（FBS1）泛素连接酶形成复合物的分子，我们总结了负责彼此结合的区域的结合特异性和鉴定，但是我们目前正在对其生物学意义进行分析。（4）FBS1和同源基因的基因敲除小鼠的生产和生产已经完成，目前正在分析中。