Positive and negative regulation of the proteasome by the glycoprotein-type transcription factor Nrf1

糖蛋白型转录因子 Nrf1 对蛋白酶体的正向和负向调节

基本信息

批准号：
22H02305
负责人：
吉田雪子
金额：
$ 10.82万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02305/
关键词：
ユビキチン糖鎖プロテアソーム Nrf1 ユビキチンリガーゼ

项目摘要

本研究は糖タンパク質型転写因子Nrf1による正と負のプロテアソーム制御機構を知ることを目的としている。本年度は、正の制御機構（脱糖鎖酵素NGLY1によるアミノ酸編集）としてプロテアソーム転写誘導活性に必須な部位を様々な変異体を作成して解析した。興味深いことに、全ての部位のアミノ酸編集は不要であり、数箇所のアミノ酸編集のみでプロテアソームの十分な転写誘導が起こることを見出した。負の制御機構については、糖鎖認識ユビキチンリガーゼSCFFBS2によるNrf1のユビキチン化について、試験管内再構成系を確立し、様々な糖ペプチドを基質として詳細に解析した。その結果、SCFFBS2は通常のリジン残基へのユビキチン化ではなく、Nrf1のN型糖鎖を認識して脱糖鎖酵素で切断されることで生じる単糖とN型糖鎖近傍のセリン・スレオニンにユビキチンをエステル結合することを明らかにした。さらに、それらの異常なユビキチン化に関わる分子群の解析を行い、通常のユビキチン化反応と異なり、複数のユビキチンリガーゼが関与することなども判明した。

这项研究旨在了解糖蛋白转录因子NRF1的阳性和阴性蛋白酶体调节机制。今年，为蛋白酶体转录活性所必需的位点创建并分析了各种突变体，作为阳性调节机制（通过脱糖链酶NGLY1编辑的氨基酸编辑）。有趣的是，我们发现并非所有地点的氨基酸编辑，并且只有少数氨基酸编辑的位点会导致蛋白酶体的足够转录诱导。关于负调控机制，通过糖基化的链链识别的泛素泛素连接酶SCFFFBS2建立了体外重建系统，用于将NRF1泛素化，并详细分析了各种糖肽。结果，据揭示了SCFFBS2不会泛素化于正常的赖氨酸残基，而是通过识别NRF1的N型糖链而产生的单糖蛋白与单糖蛋白结合，并用NRF1的N型糖链并用Deglycans链酶，以及N-vicpe Chager of Nrf Lycans链链球蛋白和硫代链蛋白链中的含糖。此外，进行了对异常泛素化的分子的分析，并且发现与通常的泛素化反应不同，涉及多个泛素连接酶。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Relationship between FBS2 and ENGase in NGLY1 deficiency.

NGLY1 缺乏症中 FBS2 和 ENGase 的关系。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takahashi Tsuyoshi;Uchibayashi Tatsuya;Ishii Nozomi;Matsuo Ichiro;Yoshida Yukiko;Suzuki Tadashi;Yoshida Y.
通讯作者：
Yoshida Y.

Ever-expanding NGLY1 biology.

不断扩展的 NGLY1 生物学。

DOI：
10.1093/jb/mvab134
发表时间：
2022
期刊：
J. Biochem.
影响因子：
0
作者：
Tadashi Suzuki;Yukiko Yoshida
通讯作者：
Yukiko Yoshida

Negative regulation of Nrf1 by noncanonical ubiquitination in NGLY1 deficiency.

NGLY1 缺乏症中非典型泛素化对 Nrf1 的负调控。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
黒川泰暉;船越遼太;木元絵梨;松宮健太郎;佐藤豊;吉川貴徳;Yoshida Y.
通讯作者：
Yoshida Y.

Luminescence detection of peptide:<i>N</i>-glycanase activity using engineered split inteins

使用工程化的分裂内含肽发光检测肽：<i>N</i>-聚糖酶活性

DOI：
10.1039/d2cc04865e
发表时间：
2022
期刊：
Chemical Communications
影响因子：
4.9
作者：
Takahashi Tsuyoshi;Uchibayashi Tatsuya;Ishii Nozomi;Matsuo Ichiro;Yoshida Yukiko;Suzuki Tadashi
通讯作者：
Suzuki Tadashi

NGLY1 deficiency causes proteasome dysfunction.

NGLY1 缺乏会导致蛋白酶体功能障碍。