活性型低酸素応答性転写因子HIF-1α遺伝子導入マウスの作製および解析

主动缺氧反应转录因子HIF-1α转基因小鼠的产生和分析

基本信息

批准号：
15024247
负责人：
谷本圭司
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

hypoxia-inducible factor-1(HIF-1)は低酸素刺激に応答する転写因子で,癌組織の増殖・転移に重要な役割を果たしていると考えられている。本申請は,ヒトで見出された遺伝子型のHIF-1α(活性型HIF-1α)を遺伝子導入したマウスを作製し,癌の増殖・進展および転移能に与える遺伝子型の影響を明らかにしすることを目的とする。ヒト口腔扁平上皮癌検体を用いた解析の結果,P582SまたはA588Tのどちらかの遺伝子アリールを持つ患者(ヘテロ型)の腫瘍は,WT(ホモ型)のそれよりも有意に多くの腫瘍内血管を持つこと,初診時腫瘍径が大きいことを報告し,転写活性化能に違いが認められるHIF-1α遺伝子多型が腫瘍の増殖や進展に関与する可能性を示してきた。本年度までに,CMVプロモーターを用いた,FLAG標識ヒトHIF-1α野性型(WT)またはアミノ酸置換型(P582SおよびA588T)遺伝子発現ベクター導入BALB/cマウス3種,数系統のヘテロ型F2までの交配が進んでおり,現在,導入遺伝子数を揃えたホモ型の交配作製に取り組んでいる。導入ヒトHIF-1α遺伝子やHIF-1標的遺伝子の小腸,腎臓,脾臓などでの高発現が認められ,脾臓の腫大も観察されている。現在,組織および分子レベルでの詳細な解析が進行中である。

缺氧诱导因子-1（HIF-1）是一种对缺氧刺激做出反应的转录因子，被认为在癌症组织的生长和转移中发挥重要作用。本申请旨在培育具有人类中发现的 HIF-1α 基因型（活性 HIF-1α）的转基因小鼠，并阐明基因型对癌症生长、进展和转移潜力的影响。使用人类口腔鳞状细胞癌标本进行分析的结果显示，具有 P582S 或 A588T 基因等位基因（异型）的肿瘤患者的肿瘤内血管明显多于 WT（同型）患者。据报道，HIF-1α 基因的肿瘤内血管明显增多。多态性表现出转录激活能力的差异，可能与肿瘤的生长和进展有关。到本财年，使用CMV启动子引入了三种类型的BALB/c小鼠和几种带有FLAG标签的人HIF-1α野生型（WT）或氨基酸取代型（P582S和A588T）基因表达载体，并且多种菌株被引入杂合子 F2 的培育正在取得进展，目前我们正在努力创建具有相同数量引入基因的纯合杂种。在小肠、肾脏和脾脏中观察到导入的人HIF-1α基因和HIF-1靶基因的高表达，并且还观察到脾脏增大。目前正在进行组织和分子水平的详细分析。