バーシカンコンドロイチン硫酸の生体内機能

多功能硫酸软骨素的体内功能

基本信息

批准号：
20057027
负责人：
渡辺秀人
金额：
$ 4.86万
依托单位：
Aichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

バーシカンは細胞外マトリックスに存在する巨大なコンドロイチン硫酸(chondroitin sulfate、CS)プロテオグリカンで、細胞外マトリックスのダイナミズムを司ると考えられている。本研究の目的は、バーシカンが持つCS鎖の生体内機能を解明することである。平成21年度の成果を以下に記す。発生期四肢の間葉系細胞に特異的にバーシカンの発現を欠損するPrx1-Cre/Cspg2<flox/flox>マウスを解析したところ、同変異マウスは正常に出生するが下肢足指の変形が観察された。組織学的解析から足指の変形の本体は異所性の肥大軟骨細胞結節の形成と関節表面の傾斜であり、これらの変異の原因が軟骨分化の遅延とこれによるInterzone(将来関節を形成する部位)の形成不全によることがわかった。バーシカン欠損による軟骨分化遅延機構を解析する目的でmicromass culture系を用いてシグナル分子やそのリセプターの分布を検討したところ、バーシカンがTGF-βの細胞外局在を制御するころが明らかとなった。当該機能はバーシカンのCS鎖によるものではないことがわかった(論文投稿中)。現在、バーシカンによるTGF-βシグナル制御機構を解析中である。CS鎖糖鎖骨格の合成に関与する糖転移酵素は現在6種類知られている。我々はこれらのうち3つの遺伝子酵素群のノックアウトマウスの作製と解析を遂行してきた。表現型は認められないか、あってもごく軽度であり、これらの観察結果は6種類の糖転移酵素に機能的相補性があることを示唆している。今後はこれらのマウスに病態を作製して表現型が出現するか否かを判定するとともにダブルノックアウトマウスの作製と解析を通じて酵素群の生体内における役割の解析を行う予定である。

蠕虫是一种巨大的硫酸软骨素（CS）蛋白聚糖，存在于细胞外基质中，被认为可以控制细胞外基质的动力学。这项研究的目的是阐明bar sikan的CS链的生物学功能。 2009年的结果如下所述。 PRX1-CRE/CSPG2 <flox/flox>小鼠在肢体发生中特异性缺陷，但通常观察到下肢和脚趾的变形。从组织分析中，脚趾的变形是形成过度的细胞结节和关节表面的倾斜度，并且这些突变的原因延迟了软骨分化和间质的裂解（形成了未来的关节）该部分是由于形成失败所致。使用Micromass培养系统检查信号分子及其分离器的分布，以分析由于bar-sikan的损失而分析软骨分化机制，因此据揭示了Bar Sikan控制了TGF-β-β-β-β-sodetary。事实证明，该功能不是归因于Sikan的CS链（在帖子中）。目前，Sikan正在分析TGF-β信号控制机制。目前，目前已知参与CS链糖领骨骼合成的六种糖旋转酶。我们已经在三种遗传酶中制作并分析了敲除小鼠。表达类型尚未识别，并且非常温和，这表明这些观察结果与六种糖旋转酶相辅相成。将来，我们计划在这些小鼠中创建一种病理状况，以确定是否会出现表达类型，并通过对双基因敲除小鼠的创造和分析来分析酶组在活体中的作用。