細胞外マトリックス構築と細胞へのシグナル伝達制御におけるバーシカンの役割

多功能蛋白聚糖在细胞外基质构建和细胞信号转导控制中的作用

基本信息

批准号：
18060042
负责人：
渡辺秀人
金额：
$ 5.12万
依托单位：
Aichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

1.Cspg2^<flox/flox>マウス系列とPrxl-Creマウスとを交配させ、間充織特異的にバーシカン発現を欠失するマウスを作製し、解析を行ったところ、同コンディショナルノックアウトマウスは正常に出生したが生後4週頃より後肢の指に変形が出現した。また、ROSA26マウス系列とPrx1-Creマウスとを交配させprx1プロモーターの活性を経時的に解析したところ、生後2週の骨軟骨膜にも発現することがわかった。現在、指の異常の発症機構を探索中である。2.バーシカンのG1ドメイン内のAサブドメインを欠失したノックインマウスの解析を行い、同マウスが胎生期10.5-出生までの間に心形成不全によって死亡することを見出した。同マウスでは心臓の基本構造の形成に異常はないが、心室壁の拡張が観察され、これに伴う心不全が死因と考えられた。心拡張発症機構に関しては、細胞外マトリックス内のBMPとTGFbetaの貯留量およびこれら分子のシグナル伝達の異常にもとづく心筋細胞の分化障害が原因と考えられた(論文投稿中)。3.軟骨は多量のコンドロイチン硫酸プロテオグリカンを含む。軟骨細胞のCS合成を司る糖転移酵素群に関して検討し、CSN-アセチルガラクトサミン転移酵素-1(CSGa1NAcT-1)がCS合成の鍵を握る酵素であることを明らかにした(Sakai,K.,et a1.,J Biol Chem.,2007)。4.バーシカンは軟骨の初期発生に必須の分子であり、軟骨発生・分化におけるBMPの作用機序の研究はバーシカンの軟骨発生における役割の研究に深く関与すると考えられる。本研究に関連する研究成果として、軟骨分化を促進するBMPのシグナル伝達経路を解析し、同リセプターに結合する分子としてSplicing factor 3bを同定した。

1.我们将Cspg2^<flox/flox>小鼠系与Prxl-Cre小鼠杂交，产生了间充质中特异性缺乏versican表达的小鼠，并分析了它们的婴儿出生正常，但在出生后4周左右，出现了畸形。在后腿的手指上。此外，当我们将ROSA26小鼠系与Prx1-Cre小鼠杂交并分析prx1启动子随时间的活性时，我们发现它也在两周大的骨软骨膜中表达。我们目前正在寻找手指异常发生背后的机制。 2.我们分析了多功能蛋白聚糖G1结构域中缺少A亚结构域的敲入小鼠，发现这些小鼠在胚胎10.5期至出生期间死于心脏发育不全。尽管小鼠心脏基本结构的形成没有异常，但观察到心室壁扩张，并且伴随的心力衰竭被认为是死亡原因。关于心脏扩张的发病机制，人们认为其原因是细胞外基质中BMP和TGFβ的积累导致心肌细胞的分化受损以及这些分子的信号转导异常（论文进行中）。 3、软骨中含有大量的硫酸软骨素蛋白多糖。我们研究了控制软骨细胞中 CS 合成的糖基转移酶组，发现 CSN-乙酰半乳糖胺转移酶-1 (CSGa1NAcT-1) 是 CS 合成的关键酶 (Sakai, K., et al. a1., J Biol Chem., 2007 ）。 4、Versacan是软骨早期发育的必需分子，研究BMP在软骨发育和分化中的作用机制被认为深入参与Versacan在软骨发育中作用的研究。作为与本研究相关的研究结果，我们分析了促进软骨分化的BMP信号转导途径，并鉴定了剪接因子3b作为与该受体结合的分子。