Evi1遺伝子群による細胞接着を介した白血病幹細胞維持機構の解明

阐明Evi1基因组细胞粘附介导的白血病干细胞维持机制

基本信息

批准号：
20012043
负责人：
森下和広
金额：
$ 7.17万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20012043/
关键词：
EVI1 ITGA6 ITGB4 GATA-2 がん幹細胞転写因子接着因子 Integrin アセチル化修飾 EVIl

项目摘要

EVI1遺伝子は難治性白血病の原因遺伝子であり、これまでEVI1欠損マウスの解析から造血幹細胞維持に係わる転写因子としての性質を同定していた。そこで白血病幹細胞維持に係わる機構を同定するために、ターゲット遺伝子群の同定並びにEVI1高発現白血病細胞の機能解析を行い、GATA-2の転写調節への関与と、白血病細胞の性質として細胞接着能の亢進を同定した。この細胞接着能の亢進は主としてMatrigelへの細胞接着能であり、その原因はIntegrin遺伝子群のITGA6とITGB4の転写亢進であった。ITGA6/ITGB4 heterodimerの発現は、EVI1遺伝子により直接制御されており、再発性白血病においても有意な転写亢進が存在していた。さらに細胞接着能と抗がん剤耐性性の関係を各EVI1、ITGA6、ITGB4 shRNA導入実験、さらにはITGA6/ITGB4中和抗体を用いた実験により検討したところ、両者の中和抗体、並びにshRNA導入により、細胞接着能の低下と抗がん剤への感受性が復活することから、細胞接着能による抗がん剤耐性性の獲得によりEVI1高発現白血病が難治性である一つの性質を示していることがわかった。以上よりGATA-2の転写調節を含めITGA6とITGB4遺伝子群へのEVI1による直接的な転写調節機構が存在し、白血病を含む造血幹細胞の維持機構として、ITGA6とITGB4の高発現が存在する可能性を示唆した。さらに抗ITGA6/ITGB4抗体を作成、in vivo白血病モデルマウスを用いた投与実験により、この白血病細胞移植マウスの生存期間の延長が有意に出現したことから、難治性白血病、再発性白血病における新規治療法の開発に繋がるものと期待される。

EVI1基因是难治性白血病的致病基因，我们之前通过对EVI1缺陷小鼠的分析，确定了其作为参与造血干细胞维持的转录因子的特性。因此，为了确定白血病干细胞维持的机制，我们鉴定了靶基因，并对高表达EVI1的白血病细胞进行了功能分析，确定了其增强作用。这种增强的细胞粘附能力主要是由于细胞对Matrigel的粘附能力，其原因是Integrin基因组ITGA6和ITGB4的转录增加。 ITGA6/ITGB4异二聚体的表达受EVI1基因直接调节，即使在复发性白血病中也观察到显着的转录增强。此外，我们通过使用EVI1、ITGA6和ITGB4 shRNA导入实验以及使用ITGA6/ITGB4中和抗体的实验，研究了细胞粘附能力和抗癌药物耐药性之间的关系。结果，细胞粘附能力降低，对抗癌敏感性降低。我发现，EVI1高表达的白血病由于细胞粘附能力而获得抗癌药物耐药性，因此是难治性的。综上所述，EVI1对ITGA6和ITGB4基因组存在直接转录调控机制，包括GATA-2的转录调控，提示ITGA6和ITGB4的高表达可能作为包括白血病在内的造血干细胞的维持机制而存在。。此外，还创建了抗ITGA6/ITGB4抗体，并使用体内白血病模型小鼠进行的实验表明，移植这些白血病细胞的小鼠的存活期显着延长，从而为难治性白血病和复发性白血病提供了新的治疗方法。预计这将导致发展