細胞間接着構造形成における、アクチン繊維の張力に依存した構成要素集積のメカニズム

肌动蛋白纤维张力依赖性成分积累在细胞间粘附结构形成中的机制

基本信息

批准号：
19036035
负责人：
米村重信
金额：
$ 3.52万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでに細胞間接着装置の主要タンパクの一つであるαカテニンがアクチン、ミオシンによる張力依存的にもう一つの主要タンパクであるビンキュリンと結合するようになることを示してきている。当該年度はミオシンだけでなく、アクチンを脱重合させてもビンキュリンがαカテニンから離れることを細胞内で示し、これまでの結果はさらに支持された。αカテニンの張力依存的なビンキュリン結合部位が分子のほぼ中央にあることをこれまでに明らかにしていたが、分子のC末端にもビンキュリン結合能が報告されている。本当にこのC末端でのビンキュリンとの結合が細胞内で意味があるのかを調べるため、その領域を含む断片を細胞内に発現させてみた。その領域は一方でアクチン繊維との結合能もあることがわかっているが、細胞内ではその断片はアクチン繊維に沿って分布し、また、時としてアクチン繊維の凝集を作った。その凝集隗の中にはビンキュリンは全く見られなかった。これらの結果は、ビンキュリンとアクチン繊維と両方に結合能のあるαカテニンC末端は、細胞の中ではより強くアクチン繊維と結合していて、実質的にビンキュリンとの結合は行っていないことを示している。さらに実験的にαカテニンに張力を与えてビンキュリンが動員するのかどうかを示す系を立ち上げようと工夫を重ねでいる。細胞に付着させた磁気ビーズを磁力で引っ張る、ガラスニードルを細胞に接着し、それを引っ張る等の系の確立のために試行錯誤している。

我们之前已经证明，α-连环蛋白是细胞间粘附装置中的主要蛋白质之一，通过肌动蛋白和肌球蛋白以张力依赖性方式与另一种主要蛋白质纽蛋白结合。今年，我们发现不仅是肌球蛋白，肌动蛋白的解聚也会导致纽蛋白与细胞中的α-连环蛋白分离，进一步支持了之前的结果。此前已有研究表明，α-连环蛋白的张力依赖性纽蛋白结合位点几乎位于分子的中心，但在分子的 C 末端也报道了纽蛋白结合能力。为了研究与纽蛋白的 C 端结合在细胞内是否真正有意义，我们在细胞内表达了包含该区域的片段。另一方面，发现该区域具有与肌动蛋白纤维结合的能力，并且在细胞内，碎片沿着肌动蛋白纤维分布，偶尔形成肌动蛋白纤维的聚集体。在聚集体中没有发现纽蛋白。这些结果表明，α-连环蛋白的C末端具有与纽蛋白和肌动蛋白纤维两者结合的能力，与细胞中的肌动蛋白纤维结合更牢固，并且基本上不与纽蛋白结合。此外，我们正在努力建立一个实验系统，以证明纽蛋白是否通过对α-连环蛋白施加张力而被动员。我们正在反复试验来建立系统，例如使用磁力拉动附着在细胞上的磁珠，或者将玻璃针附着在细胞上并拉动它们。

项目成果

期刊论文数量（14）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

「細胞・培地活用ハンドブック」5章細胞骨格研究

《细胞/培养基利用手册》第五章细胞骨架研究

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kiyosue;Y
通讯作者：
Y

Self-organized formation of polarized cortical tissues from ES cells and its active manipulation by extrinsic signals.

ES 细胞自组织形成极化皮质组织及其通过外在信号的主动操纵。

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Cell Stem Cell 3
影响因子：
0
作者：
Eiraku;M
通讯作者：
M

The keratin-binding protein Albaross regulates polarization of epithelial cells.

角蛋白结合蛋白 Albaross 调节上皮细胞的极化。

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
J Cell Biol. 183
影响因子：
0
作者：
Sugimoto;M
通讯作者：
M

EPB41L5 functions to post-transcriptionally regulate cadherin and integrin during epithelial-mesenchymal transition.

DOI：
10.1083/jcb.200712086
发表时间：
2008-09-22
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
0
作者：
Hirano M;Hashimoto S;Yonemura S;Sabe H;Aizawa S
通讯作者：
Aizawa S

Conditional ablation of GFR 1 in postmigratory enteric neurons triggers unconventional neuronal death in the colon and causes a Hirschsprung's disease phenotype.

迁移后肠神经元中 GFR 1 的条件性消融会引发结肠中非常规的神经元死亡，并导致先天性巨结肠症表型。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Development 134
影响因子：
0
作者：
Davoodi Vijeh Motlagh;N.;Seki;M.;Branzei;D.;Enomoto;T.;関政幸;関政幸/多田周右/榎本武美;T.Uesaka
通讯作者：
T.Uesaka

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DOI：
发表时间：
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期刊：
Comptes Rendus Chimie 9
影响因子：
0
作者：
北川泰雄;小堀雅登;鳥山和宏;鳥居修平;米村重信;I.Otsuka;H.Nakamura;E.D.Mishina;S.Moribe
通讯作者：
S.Moribe

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DOI：
发表时间：
2005
期刊：
銅と銅合金 (印刷中)
影响因子：
0
作者：
北川泰雄;小堀雅登;鳥山和宏;鳥居修平;米村重信;I.Otsuka
通讯作者：
I.Otsuka

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DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Davoodi Vijeh Motlagh;N.;Seki;M.;Branzei;D.;Enomoto;T.;関政幸;関政幸/多田周右/榎本武美;T.Uesaka;E.Takaki;T.Watanabe;Y.Miyake;A.Wada;Y.Yamaguchi;米村重信
通讯作者：
米村重信