F-box DNAヘリケースの組換え修復における機能とその欠損の分子病態

F-box DNA解旋酶在重组修复中的功能及其缺陷的分子病理学

基本信息

批准号：
18012031
负责人：
森田隆
金额：
$ 8万
依托单位：
Osaka City University (2007)Osaka University (2006)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

分裂酵母から新規の組換え修復遺伝子として同定されたfbh1遺伝子のコードするタンパクは,SCFユビキチンリガーゼ複合体の基質サブユニットの特徴であるF-boxモチーフを持ち,同時にヘリケースの活性をもつユニークなタンパクである。酵母を用いて,fbh1タンパクの機能ドメインについて解析した結果,F-boxに突然変異を導入したもの(Fbh1-fb)では,このタンパクの核への移行が阻害され,その機能を完全に喪失した。一方,ヘリケースドメインに変異を導入したもの(fbh1-hl)では,DNA損傷なしでもフォーカス形成がみられ,DNA損傷により野生型よりもさらに強くフォーカス形成が誘導されることが明らかになった。これらのことは,それぞれのドメインが別の機能をもつとともに,SCFFbh1の複合体形成が核への移行とDNA損傷に依存するフォーカス形成に重要であることを示している(Sakaguchi, et. al.BMC Mol Biol.2008,9,27)。哺乳動物にも,Fbh1遺伝子がホモログとして存在する。その発現は,ユビキタスであり,種々の細胞に発現している。われわれは,この遺伝子をクローニングし,ノックアウトマウスを作成した。その結果,この遺伝子欠損によってもマウスは致死ではなく,正常に誕生し発育,繁殖も可能であることが分かった。このマウスの個体と細胞について,X線照射したが,感受性は野生型と同様であり,DNA二重鎖切断損傷の修復に欠陥があるとはいえなかった。この遺伝子のDNA修復に対する機能を他のDNA損傷あるいは別のストレスを与え,長期間観察による発がんなどへの影響を明らかにすることが必要である。

由FBH1基因编码的蛋白质是一种独特的蛋白质，它是一种具有F-box基序的独特蛋白质，它是SCF泛素链蛋白牵引酶复合酶复合物的底物亚基的独特蛋白质，也是具有螺旋碱基活性的独特蛋白质的特征。使用酵母，我们分析了FBH1蛋白的功能结构域，发现将突变引入F-box（FBH1-FB）的功能结构域，该蛋白向细胞核的转移被抑制，从而完全丧失了其功能。另一方面，将突变引入螺旋病例结构域（FBH1-HL），即使没有DNA损伤也观察到了焦点形成，并且发现DNA损伤会引起焦点形成甚至比野生型强。这些表明每个结构域具有不同的功能，并且SCFFBH1复合物的形成对于核转运和DNA损伤依赖性聚焦形成很重要（Sakaguchi等，等人，等人BMC Mol Biol。2008，9，27）。 FBH1基因也作为同源物存在于哺乳动物中。它的表达无处不在，并在多种细胞中表达。我们克隆了这个基因并创建了淘汰小鼠。结果表明，这种基因缺乏并没有杀死小鼠，但可以正常出生，发展和再现。小鼠的个体和细胞被X射线照射，易感性与野生型相似，并且在修复DNA双链断裂损伤方面并不缺乏。有必要通过引起其他DNA损伤或其他压力来阐明该基因进行DNA修复的功能，并阐明长期观察对癌症等的影响。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Cooperative Roles of Vertebrate Fbhl and Blm DNA Helicases in Avoidance of Crossovers during Recombination Initiated by Replication Fork Collapse.

脊椎动物 Fbhl 和 Blm DNA 解旋酶在复制叉崩溃引发的重组过程中避免交叉的协同作用。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Mol Cell Biol. 27
影响因子：
0
作者：
Kohzaki M;llatanaka A;Sonoda E;Yamazoe M;Kikuchi K;Trung NV;Szuts D;Sale JE;Shinagawa H;Watanabe M;Takeda S
通讯作者：
Takeda S

Unified mode of centromeric protection by shugoshin in mammalian oocytes and somatic cells