組換え遺伝子(Rad51)を用いた難治がんの放射線治療

使用重组基因（Rad51）治疗顽固性癌症

基本信息

批准号：
13218113
负责人：
森田隆
金额：
$ 24.45万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

がんの放射線法や化学療法には、がんのもつ自然耐性、あるいは獲得耐性によって、臨床的な治療効果に限界がみられることがある。さらに、いずれの治療においても正常組織が障害を起こさず、副作用を少なくするために照射する放射線強度、抗がん剤の濃度を抑える必要があり、十分な治療効果が得られないことがある。我々は、がんの放射線治療における増感効果を得るために、DNA修復に関する遺伝子機能の抑制による効果を検討した。Rad51遺伝子のアンチセンスSオリゴやモルフォリノオリゴをマウスマウステラトカルシノーマF9細胞やグリオーマ細胞に導入し、放射線増感効果を検討した。その結果、Rad51アンチセンスオリゴでは、RAD51タンパクが抑制され、放射線増感効果がみられた。モルフォリノオリゴでは、Rad51遺伝子の抑制は限定的であった。さらに、近年開発されたRNAiによりRad51,Rad54,Ku80などのタンパク合成をヒトHeLa細胞やマウステラトカルシノーマF9細胞を用いて特異的に抑制したところ、癌細胞のX線や、さらにシスプラチンに対する感受性が増加することを明らかにした。siRNAは投与後、分解されるため、遺伝子治療のような問題は少ないと考えられる。また、Rad51,Rad54,Ku80遺伝子のRNAiを同時に作用させても、その発現が低下したことから、DNA修復遺伝子の多重抑制による増感効果が期待される。今後、固形腫に対して、どのようにRNAiを導入するかその有効な方法を開発したり、RNAiの種類を検討するような系統的な研究開発が実験動物レベルで必要である。一方、我々は、癌細胞の放射線感受性をピストンH2AX遺伝子の発現を抑制することにより制御できる系を確立した。この細胞は、放射線や抗癌剤による作用機序の解析や薬効評価に利用でき、がんの放射線治療に有用と考えられる。

由于癌症拥有的自然或获得性抗性，放射学和化学疗法可能具有有限的临床治疗功效。此外，在任何治疗中，正常组织都不会受到损害，并且有必要抑制辐射的强度和抗癌剂的浓度以减少副作用，并且可能无法实现足够的治疗作用。我们研究了抑制基因功能对DNA修复的影响，以获得癌症放射治疗的敏感性。将RAD51基因的反义S和吗啡寡素引入小鼠Teracalcinoma肿瘤F9细胞和神经胶质瘤细胞中，并研究了辐射敏感性的效应。结果，Rad51反义寡素抑制了Rad51蛋白，并显示出辐射敏感性的作用。在吗啡寡素中，对Rad51基因的抑制受到限制。此外，当蛋白质合成（例如RAD51，RAD54，KU80）使用人类HeLa细胞和小鼠Teratocalcinoma瘤F9细胞进行了特异性抑制，近年来使用RNAI开发的RNAI，据揭示了癌细胞对X射线和顺铂的敏感性增加。由于siRNA在给药后降解，因此人们认为基因治疗等问题很少。此外，即使同时激活了RAD51，RAD54和KU80基因的RNAi，基因的表达也降低，因此预期了多重抑制DNA修复基因的敏感性。将来，在实验性动物水平上进行系统的研究和开发，例如开发用于实体瘤的RNAi的有效方法并检查RNAi的类型。另一方面，我们建立了一个可以通过抑制活塞H2AX基因的表达来调节癌细胞的辐射敏感性的系统。这些细胞可用于分析由辐射和抗癌药引起的作用机理，并评估药物的疗效，并被认为对癌症放射治疗有用。