始原生殖細胞の形成直後の発現するnanos3の機能解析

原始生殖细胞形成后立即表达的nanos3的功能分析

• 批准号: 17045035
• 负责人: 三井 薫
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Saitama Medical University (2006)National Institute of Genetics (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17045035/
• 关键词: 始原生殖細胞; RNA結合タンパク質; nanos3; アポトーシス; Bax; ノックアウトマウス

Nanos3は始原生殖細胞(PGC)において形成初期から生殖巣到達直後まで発現するRNA結合タンパク質でnanos3を欠損したマウス成体では雌雄共に生殖巣が顕著に矮小化しており、生殖細胞を完全に欠損する。我々は、Nanos3を欠損したPGCが移動期にアポトーシスを起こして失われること、その一部が細胞死誘導因子Baxを欠損させることでレスキューされることを報告した。しかしNanos3,BAX-ダブル欠損マウスでもかなりの数のPGCが失われることから、Nanos3が欠損すると体細胞系列に分化する可能性が考えられた。その点を明らかにするために、Nanos3遺伝子座にCre recombinaseをノックインしたマウス(Nanos3-cre)を作成し、細胞系譜を解析した。その結果、残念ながら我々の作成したマウスにおいては、一部のPGCにしかCre recombinaseの発現が誘導できないことがわかった。この原因に関しては不明であるが、少なくとも、Nanos3-creを発現した細胞系譜はほぼ生殖細胞に限局されており、Nanos3欠損マウスにおいては、Cre recombinaseを発現した細胞系譜は完全に消失し、かつ体細胞系譜にレポーター活性を有する細胞はみられなかった。したがって、Nanos3欠損マウスではほぼすべての生殖細胞は消失する。さらに、Nanos3/BAXダブル欠損マウスにおいても同様の細胞系譜追跡実験をおこなった。この場合はレスキューされた生殖細胞はレポーター活性を有するがやはり体細胞に分化した細胞は観察されなかった。このことから、生殖細胞消失の原因が、Nanos3を欠損することにより生殖細胞の性質が失われて体細胞に分化することである可能性は、ほぼ否定できると思われる。

Nanos3 是一种 RNA 结合蛋白，在原始生殖细胞 (PGC) 形成的早期直至到达性腺后表达。在缺乏 nanos3 的成年小鼠中，两性的性腺都明显矮化，生殖细胞也明显矮化。完全迷失了。我们报道缺乏 Nanos3 的 PGC 会发生凋亡并在迁移阶段丢失，并且部分丢失可以通过删除细胞死亡诱导因子 Bax 来挽救。然而，即使在 Nanos3、BAX 双缺陷小鼠中，也有大量 PGC 丢失，这表明 Nanos3 缺陷可能导致分化为体细胞谱系。为了澄清这一点，我们创建了一只在 Nanos3 基因位点 (Nanos3-cre) 处敲入 Cre 重组酶的小鼠，并分析了其细胞谱系。不幸的是，我们发现 Cre 重组酶表达只能在我们创建的小鼠的某些 PGC 中被诱导。其原因尚不清楚，但至少表达Nanos3-cre的细胞谱系几乎局限于生殖细胞，而在Nanos3缺陷的小鼠中，表达Cre重组酶的细胞谱系完全消失，并且没有发现具有报告活性的细胞。细胞谱系。因此，Nanos3缺陷小鼠中几乎所有生殖细胞都丢失了。此外，我们在 Nanos3/BAX 双缺陷小鼠中进行了类似的细胞谱系追踪实验。在这种情况下，虽然获救的生殖细胞具有报告活性，但没有观察到分化为体细胞的细胞。由此看来，生殖细胞丧失的原因是Nanos3的缺失导致生殖细胞特性丧失并分化为体细胞的可能性几乎可以排除。