ハイブリッド形成により細胞情報伝達システムをマルチ制御する機能性分子の開発

开发通过杂交多重调节细胞信号转导系统的功能分子

基本信息

批准号：
17035063
负责人：
永次史
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、癌細胞で過剰発現している遺伝子に対してハイブリッドを形成しその発現を阻害すると同時に、薬剤を放出することで標的タンパクの機能を制御する、マルチ制御機能によりシグナル伝達をコントロールできる機能性分子の開発を目的としている。すでに私は標的との2本鎖内で特異的に活性化されシチジンに対して選択的にクロスリンク反応する2-amino-6-vinyl purineを開発している。さらにこの反応中で反応性官能基のマスキング剤に使ったスルフィド基で結合した分子が放出されることを確認している。本年度はまず細胞内で標的に対してハイブリッドを形成し、スルフィド官能基を効率よく脱離する構造を検索する目的で、これらの反応を可視化できる方法の構築を計画した。その方法としてFRET現象の利用を計画し、まず2つの蛍光団を持つ機能性オリゴDNAを合成し、スルフィド結合した消光団が遊離しFRETが解消されることで増強される蛍光を指標に、標的遺伝子に対しハイブリッドを形成することで容易に遊離するスルフィド官能基の検索を行った。その結果、消光剤としてダブシル基をスルフィド結合させた2-amino-6-alkyl purine誘導体を含むオリゴDNAの末端に、蛍光団としてフルオレセインを導入したオリゴDNAが、効率よくFRET現象を起こすことを見出した。さらにこのオリゴDNAを、試験管内で標的位置にシトシンを含む配列のオリゴDNAと混合したときのみ、消光剤の脱離に伴う蛍光の増強が観測された。この結果は今回合成した機能性オリゴDNAが、標的に対して選択的なハイブリッド形成することで増強される蛍光を指標に、細胞内における化学反応も追跡できるものと考えられる。本年度の研究により細胞内におけるマルチ制御機能によりシグナル伝達をコントロールする機能性分子の開発の方法論の基礎が確立したものと考えている。

这项研究旨在开发能够通过多调节功能控制信号转导的功能分子，这些功能与癌细胞中过表达的基因形成杂种并抑制其表达，同时同时释放药物以控制靶蛋白的功能。我已经开发了一个2-氨基-6-乙烯基嘌呤，该二硫酸盐在具有靶标的双链中特异性激活，并且选择性地交联反应。此外，在此反应期间，释放了被用作反应性官能团的掩模剂的分子。今年，我们计划构建一种使我们能够可视化这些反应的方法，其目的是首先找到与细胞中靶标形成杂种并有效去除硫化物官能团的结构。作为一种方法，我们计划使用FRET现象，并首先与两个荧光团合成功能性寡素，并搜索硫化物官能团，并使用与靶基因形成杂种，使用荧光通过硫化物键入的Quencher释放而增强的荧光来释放荧光，并将FRET释放为Index in Index。结果，发现含有2-氨基-6-烷基嘌呤衍生物的寡素体和硫化物键合的dabusyl基团作为淬灭剂，有效地引起了FRET现象。此外，只有在将这种寡头与具有含有胞嘧啶的序列含有胞嘧啶的靶标在其靶位置的靶位位置的测试管中混合时，才能观察到荧光的增强荧光。该结果表明，通过这次合成功能性寡素的选择性杂种增强的荧光可以通过增强的荧光来跟踪细胞内的化学反应。今年的研究已经建立了开发功能分子方法的基础，该功能分子通过细胞内的多调控功能控制信号转导信号。

项目成果

期刊论文数量（11）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Intracellular Ability of an Inducible Alkylation System to Exhibit Antisense Effects with Greater Potency and Selectivity

诱导型烷基化系统的细胞内能力以更强的效力和选择性表现出反义效应

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Angew.Chem.Int.Ed (In press)
影响因子：
0
作者：
Ali M.M.;Oishi M.;Nagatsugi F.;Mori K.;Nagasaki Y.;Kataoka K.;Sasaki S
通讯作者：
Sasaki S

Expansion of triplex recognition codes by the use of novel bicyclic nucleoside derivatives (WNA)

使用新型双环核苷衍生物（WNA）扩展三链体识别代码

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Nucleosides Nucleotides Nucleic Acid 24
影响因子：
0
作者：
Taniguchi;Y.;Nakamura;A.;Senko;Y.;Kodama;K.;Nagatsugi;F.;Sasaki;S
通讯作者：
S

Supramolecular assemblies for the cytoplasmic delivery of antisense oligodeoxynucleotide : Polylon complex (PIC) micells based on poly(ethylene glycol)-SS-oligodeoxynucleotide conjugate

用于反义寡脱氧核苷酸细胞质递送的超分子组装体：基于聚乙二醇-SS-寡脱氧核苷酸缀合物的Polylon复合物（PIC）胶束

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Biomacromolecules 6
影响因子：
0
作者：
M.Oishi;T.Hayama;Y.Akiyama;S.Takae;A.Harada;Y.Yamasaki;F.Nagatsugi;S.Sasaki;Y.Nagasaki;K.Kataoka
通讯作者：
K.Kataoka

Design of highly efficient and selective transfer reaction of nitrosyl group to dC and d^mC resulting in specific deamination

设计亚硝酰基向 dC 和 d^mC 的高效选择性转移反应，从而实现特异性脱氨