EPR効果に基づく活性酸素生成型高分子薬の固形癌ターゲティング療法

基于EPR效应的活性产氧高分子药物实体瘤靶向治疗

基本信息

批准号：
17016076
负责人：
前田浩
金额：
$ 19.2万
依托单位：
Sojo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

臨床がん治療薬へ実用化を目指して、PEG-ZnPPの薬理作用、ADME試験、in vivo毒性実験、及びinVivo細胞毒性実験、特に光照射によるPDTの可能性を検討した。PEG-ZnPPはヒト正常細胞においてIC_<50>>100μM、多種のヒトがん細胞においてIC_<50>=14.3±6.4μMを示し、PEG-ZnPP治療の腫瘍特異性及び安全域が広いことが明らかになった。さらに、ヒトCML細胞では、IC_<50>=5〜10μMと高い感受性を示した。Glevec耐性のCML株においても同様な感受性が見られた。体内動態解析により、PEG-ZnPPの大幅な血中半減期の延長、EPR効果による時間依存的な腫瘍への集積、緩やかな糞便からの排泄、各組織中での時聞依存的な分解が明らかになった。In vivo 毒性実験において、90mg/kg(ZnPP相当)では、急性および慢性毒性がほとんど認められなかった。PEG-ZnPPを実用化する時のコストを考える上、PEG-2000を用いてPEG(2000)-ZnPP合成した。PEG(2000)-ZnPPは体内動態、代謝及び毒性試験においてPEG(5000)-ZnPPと同様な値を示した。さらに、PEG(2000)-ZnPPは顕著な抗癌活性を示し、Xenon光源の照射により薬効が大幅に増強されることが分かった。このことから、PEG-ZnPPが薪規抗癌剤としての実用性が高いものであることが益々明らかになった。次に、ブタ型recombinantD-アミノ酸酸化酵素(rDAO)の大量生産系を確立した。PEG-rDAOは従来のPEG-DAOより活性・安定性が高いことが分かった。腫瘍組織はカタラーゼ活性が正常組織と比べて低く、この治療に対する感受性が極めて高いことが明らかとなった。さらに、PEG-rDAOのin vivo抗腫瘍活姓は多種のマウス腫瘍モデルにおいて、優れた抗腫瘍効果が得られた。ところが、この治療において、DAOの補酵素であるFAD及び基質であるD-アミノ酸(D-プロリン)の投与の量とタイミングが非常に大事であるが認識され、今後の研究はFADとより強く結合するDAOの作製について検討したい。

为了将实际应用作为临床癌症治疗药物，我们研究了PEG-ZNPP，ADME测试，体内毒性实验和体内细胞毒性实验的药理作用，尤其是光照射通过光辐射引起的PDT的可能性。 PEG-ZNPP在正常人细胞中显示IC_ <50 >>100μM，在多种人类癌细胞中IC_ <50> = 14.3±6.4μm，表明PEG-ZNPP治疗的肿瘤特异性和安全范围很广。此外，人类CML细胞显示高灵敏度，IC_ <50> =5-10μm。在耐GLEVEC的CML菌株中观察到了相似的灵敏度。刺内分析表明，由于EPR效应，PEG-ZNPP的血液半衰期显着延长，时间依赖于肿瘤，粪便的排泄缓慢以及每个组织中的听力依赖性降解。在体内毒性实验中，在90 mg/kg（对应于ZNPP）时，很少观察到急性和慢性毒性。考虑到实施PEG-ZNPP的成本，PEG（2000）-ZNPP是使用PEG-2000合成的。 PEG（2000）-ZNPP在体细胞动力学，代谢和毒性研究中显示与PEG（5000）-ZNPP相似的值。此外，PEG（2000）-ZNPP表现出显着的抗癌活性，发现使用Xenon光源的照射显着提高了药用疗效。越来越清楚的是，PEG-ZNPP作为阻燃性癌症剂高度实用。接下来，建立了用于猪型重组D-氨基酸氧化酶（RDAO）的质量生产系统。已经发现，PEG-RDAO比常规PEG-DAO更活跃和稳定。肿瘤组织的过氧化氢酶活性低于正常组织，并且高度易受这种治疗。此外，PEG-RDAO的体内抗肿瘤活性姓氏在各种小鼠肿瘤模型中都具有出色的抗肿瘤作用。但是，在这种处理中，底物的FAD，DAO的辅酶和D-氨基酸的辅酶（D-氨基酸）（底物）非常重要，未来的研究将考虑创建DAO，而Daos的创造更加强烈，而Daos的数量和时间和时间和时间更为重要。