人工タンパク質の技術開発

人工蛋白质技术开发

基本信息

批准号：
17012026
负责人：
芝清隆
金额：
$ 30.66万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

「モチーフ・プログラミング」、すなわち、機能性モチーフを組み合わせ的に重合させ、新しい多機能性人工タンパク質を創製する技術開発に取り組んだ。機能性モチーフの組み合わせ的な重合にはMolCraft法と呼ぶ独自の技術を利用した。人工タンパク質は、がん生物学の研究ツール、がんの治療、がんの診断と幅広い分野でがん研究に関わる事が出来る。ここでは特に、発がん過程に深く関わった信号伝達系に焦点を絞り、アポトーシス経路に遍在するBHI〜BH4モチーフの組み合わせ的重合から、アポトーシス経路をモジュレートする活性をもった人工タンパク質を創製した。また、タンパク質製剤を念頭に置いた、BHモチーフと細胞移入モチーフをプログラムした人工タンパク質も作製しており、その細胞指向性を調べた。また、他の信号伝達系としてインテグリン信号伝達系複合体のメンバーであるp130Casがもつ内部のSrkリン酸化モチーフに注目し、このモチーフ群を2種の代表的モチーフに分類し、この2種のモチーフをいろいろな数と順番でもつp130Cas部分人工タンパク質化した改変体を作製し、その細胞内での活性を調べた。その結果、BHI〜BH4モチーフの組み合わせ的重合からアポトーシス経路を正負に制御する人工制御因子が高頻度に生成すること、BHモチーフと細胞移入モチーフをプログラムした人工タンパク質が、癌細胞パネルに対して明確な細胞選択性をもつこと、p130Casのリン酸かモチーフをモデル化した単純改変体でも、p130Cas欠損細胞株の細胞走化性を維持することが明らかとなった。モチーフ・プログラミングによる人工タンパク質創製から、高効率に機能性人工タンパク質が創製できることがわかった。

我们通过组合功能基序“基序编程”来创建一种新的多功能人造蛋白来开发一种新的多功能人造蛋白质。对于功能基序的组合，使用了称为Molcraft方法的独特技术。人造蛋白可以参与癌症生物学研究工具，癌症治疗，癌症的诊断和广泛领域的研究工具。特别是，我们专注于深层参与致癌过程的信号传输系统，并创建了一种人造蛋白质，该蛋白质从BHI到BH4基序的组合修饰了凋亡途径，该途径在凋亡途径中得到了增强。此外，还考虑了一种对BH基序和细胞转移基序进行编程的人造蛋白质，并研究了蛋白质制剂，并检查了细胞为导向的蛋白质。此外，重点介绍了P130CAS的内部SRK磷酸化基序，即整体信号传输复合物的成员作为另一个信号传输系统，将基序组分为两个代表性基序，这两个基序是P130CAS部分 - 部分人工蛋白质修饰的身体。以各种数量和顺序形成，并检查了细胞中的活性。结果，从BHI到BH4基序的组合控制凋亡途径的人工控制因子是频繁的，并且对BH基序和细胞转移基序进行编程的人工蛋白清楚地表明，癌细胞板已经表明。细胞的选择以及对P130CAS磷酸或基序建模的简单修饰也维持P130CAS缺陷细胞的细胞运行特性。已经发现，通过基序编程创建人造蛋白质可以在高效率下创建功能性人造蛋白质。