分子遺伝学的手法を用いたBAFの細胞機能の制御に関する研究

利用分子遗传学方法研究BAF细胞功能

• 批准号: 16022223
• 负责人: 古川 和広
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022223/
• 关键词: BAF; アポトーシス; 核構造

BAF遺伝子を完全に欠失させたショウジョウバエの変異体(BAF null変異体)を用い、第1幼虫および第2幼虫の成虫原基と中枢神経組織の発生を詳細に解析した。神経組織では高頻度に核構造の異常が観察されている。神経組織においてどのような細胞集団で核構造の異常が起こっているかを明らかにするため、細胞分裂能を失った分化した神経細胞に対する特異的な抗体を用い免疫染色を行った。その結果分裂能を有する神経芽細胞でBAFが特異的に消失し核構造の異常が起こっていることが明らかになった。このような神経芽細胞ではこれまでのところTUNEL反応を用いてアポトーシスは検出されていない。一方、増殖細胞からなる成虫原基組織においてはTUNEL反応を用いアポトーシスが高頻度で起こっていることを確認している。今回は神経組織および成虫原基組織をショウジョウバエのエフェクターカスパーゼであるDrlCEの活性化型に対する特異的抗体を用いて免疫染色しアポトーシスの状態をさらに観察した。その結果、TUNEL反応と同様に、成虫原基組織では活性化型DrlCEの強いシグナルが容易に検出できたが、神経組織では活性化型DrlCEシグナルは検出できなかった。また成虫原基組織においては、アポトーシスが誘導されていない(活性化型DrlCEが検出されない)細胞の核構造を詳細に観察すると、神経細胞に見られたBAFの消失に伴う核のコンボリューションの形態が容易に観察できた。以上からBAFタンパク質の消失がアポトーシスに見られる核構造の変化と密接に関係していることが推測される。

使用BAF基因完全缺失的果蝇突变体（BAF无效突变体），我们详细分析了第一和第二幼虫的成虫盘和中枢神经组织的发育。在神经组织中经常观察到核结构异常。为了弄清楚神经组织中什么样的细胞群存在核结构异常，我们使用针对失去细胞分裂能力的分化神经细胞的特异性抗体进行了免疫染色。结果显示，BAF在具有分裂能力的神经母细胞中特异性丢失，导致核结构异常。迄今为止，使用 TUNEL 反应尚未在此类神经母细胞中检测到细胞凋亡。另一方面，我们利用TUNEL反应确认了由增殖细胞构成的成虫盘组织经常发生细胞凋亡。这次，我们使用针对果蝇效应蛋白半胱天冬酶DrlCE激活形式的特异性抗体对神经组织和成象盘组织进行免疫染色，以进一步观察细胞凋亡的状态。结果，与TUNEL反应类似，在成象盘组织中可以很容易地检测到激活的DrlCE的强信号，但在神经组织中却检测不到激活的DrlCE信号。此外，在成象盘组织中，当我们仔细观察未诱导凋亡的细胞的核结构（未检测到激活的DrlCE）时，我们发现与观察到的BAF消失相关的核卷积形态在神经元中，很容易观察到。由此推测，BAF蛋白的丢失与细胞凋亡时核结构的变化密切相关。

项目成果

LAP2a and BAF localize to telomeres and chromatin core regions transiently during nuclear assembly.

LAP2a 和 BAF 在核组装过程中短暂定位于端粒和染色质核心区域。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Cell Sci. 117
• 作者: Yuda;H.;Suzuki;K.;et al.;鈴木 宏治;M.Takano;T.Dechat
• 通讯作者: T.Dechat