MAPキナーゼシグナルと癌細胞の運動におけるアクチン重合制御

MAP 激酶信号和癌细胞运动中肌动蛋白聚合的控制

基本信息

批准号：
16022220
负责人：
末次志郎
金额：
$ 2.5万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022220/
关键词：
WAVE2 リン酸化転移細胞運動 actin cytoskeleton MAPキナーゼ

项目摘要

WAVE2は細胞の移動先端で生じる葉状仮足形成に必要不可欠なタンパク質であり、葉状仮足形成を通じて細胞の運動を制御している。本年度の研究では、WAVE2がMAPキナーゼによってリン酸化されることを見いだしていたので、リン酸化サイトをプロリンリッチ領域およびC末部に同定した。プロリンリッチ部位のリン酸化はリン酸化のおおきな割合を占めていた。しかしながら、リン酸化の有無でWAVE2をふくむタンパク質複合体の構成に大きな変化を見いだすことができなかった。また、WAVE2ノックアウト繊維芽細胞の葉状仮足形成のおよび細胞運動の欠陥をプロリンリッチ部位のリン酸化されないWAVE2の変異体でも回復することができたので、葉状仮足形成にこのリン酸化が積極的に関与している可能性は否定された。C末部のリン酸化の意義については未だ解析できていない。B16メラノーマがん細胞系列をもちいてWAVE2とがんの転移能の相関を検討したところ、WAVE2は正常細胞の運動だけでなく、マウスを用いたin vivoのがん細胞の転移にも必要不可欠であった。しかし転移性の高い系列でもリン酸化の顕著な上昇は見られなかった。次に、種々の大腸がん細胞株を用いてWAVE2のリン酸化レベルを検討したところ、Erkの活性の高い細胞株でWAVE2のリン酸化が高い傾向が見られた。しかしながら、WAVE2のリン酸化と運動能との高い相関は見られなかった。

WAVE2是形成片状伪足的必需蛋白质，片状伪足发生在细胞运动的尖端，并通过片状伪足的形成控制细胞运动。在今年的研究中，我们发现WAVE2被MAP激酶磷酸化，因此我们在富含脯氨酸的区域和C末端确定了磷酸化位点。富含脯氨酸位点的磷酸化占磷酸化的很大比例。然而，根据磷酸化的存在或不存在，含有 WAVE2 的蛋白质复合物的组成没有发现显着变化。此外，WAVE2敲除成纤维细胞中片状伪足形成和细胞运动的缺陷可以通过富含脯氨酸位点未磷酸化的WAVE2突变体得到恢复，表明这种磷酸化在片状伪足形成中具有活性，排除了任何参与的可能性。出去。 C 末端磷酸化的意义尚未分析。使用 B16 黑色素瘤癌细胞系，我们研究了 WAVE2 与癌症转移潜能之间的相关性，发现 WAVE2 不仅对于正常细胞运动至关重要，而且对于小鼠体内的癌细胞转移也至关重要。然而，即使在高度转移的细胞系中也没有观察到磷酸化的显着增加。接下来，我们使用各种结直肠癌细胞系检测了 WAVE2 的磷酸化水平，发现 Erk 活性高的细胞系往往具有较高的 WAVE2 磷酸化水平。然而，没有观察到 WAVE2 磷酸化和运动性之间的高度相关性。