リン酸化酵素DYRK2に着目した膵臓癌転移の機序解明と革新的治療法の開発

阐明胰腺癌转移机制并开发以激酶DYRK2为重点的创新治疗方法

基本信息

批准号：
22K16470
负责人：
堀内尭
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16470/
关键词：
DYRK2 EMT アデノウィルスベクターアデノウィルス膵癌

项目摘要

本研究では、膵臓癌においてDYRK2を介した転移・浸潤の分子生物学的メカニズムを明らかにすることであり、さらに膵臓癌に対する新たな革新的治療戦略の糸口を確立することである。DYRK2 は、発現低下によって ①細胞周期の制御に必須な転写因子c-Junやc-Mycの蓄積を引き起こし細胞増殖が亢進すること、②転写因子KLF4発現を誘導し癌幹細胞の増加をもたらすこと、 ③上皮間葉転換(EMT)の転写因子Snail発現亢進によりEMTを誘導することが報告されており、膵臓癌の進行や転移・浸潤にも影響を与えている可能性が強く示唆されるが、そのメカニズムを検討した研究は少ない。また、DYRK2を過剰発現させた場合の膵臓癌の進展に関しても報告が少なく、申請者はDYRK2を過剰発現させることで膵臓癌のEMTや転移能を抑制すると仮説した。今回我々は、ヒト膵臓癌細胞株においてDYRK2遺伝子に対するshRNAを用いてDYRK2をノックダウンさせ、Migration assayやInvasion assayを用いて評価を行う。また、Western blot法やRTPCR法を用いて以下に示すEMT関連蛋白(Snail, E-cadherin, Vimentin)や接着・浸潤に関する蛋白 (MMP-9, ICAM-1, VCAM-1)を評価する。DYRK2をノックダウンさせた膵臓癌細胞株の遺伝子変化を転移に関する遺伝子を中心にマイクロアレイで網羅的に解析する。

在这项研究中，是为了阐明胰腺癌中通过DYRK2通过DYRK2浸润的分子生物学机制，并为胰腺癌建立新的创新治疗策略。 DYRK2导致C-JUN和C-MYC的积累，这对于控制细胞周期至关重要，并增加细胞增殖，并通过诱导转录因子KLF4表达来诱导癌症干细胞的增加据报道，由于上皮叶转换（EMT）的蜗牛表达增强而引起EMT，并强烈建议它影响了胰腺癌，转移和入侵的进展。此外，在过度DYRK2的情况下，几乎没有关于胰腺癌进展的报道，申请人假设过度的DYRK2会抑制胰腺癌的EMT和转移能力。这次，我们使用shRNA在人类胰腺癌细胞库存中使用shRNA击倒DYRK2，并使用迁移关联和Invision Assay评估。它还使用蛋白质印迹和RTPCR方法评估了EMT相关蛋白（Snail，E-Cadherin，Vimentin）和粘合剂和浸润（MMP-9，ICAM-1，VCAM-1）。用微射线以转移为中心的微射线分析了击倒DYRK2的胰腺癌细胞的基因变化。