炎症性サイトカインIL-1βによる腫瘍血管新生および転移促進作用の解析

炎症细胞因子IL-1β促进肿瘤血管生成及转移作用分析

• 批准号: 16022206
• 负责人: 西條 康夫
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022206/
• 关键词: 固形腫瘍; 血管新生; 転移; IL-1β

1.LLC/lL-1β腫瘍血管新生における骨髄由来細胞の関与の解析GFPマウスの骨髄細胞(1x10^6/マウス)を移植したキメラマウスに、IL-1遺伝子導入ルイス肺がん細胞(LLC/IL-1)を皮下移植し、10日後に腫瘍を取り出した。組織切片を、CD45と血管内皮細胞のマーカーであるCD31抗体で反応させた後PEでラベルし、Double positive細胞(GFPおよびCD45、CD31陽性)細胞数を評価し、骨髄細胞の血管内皮細胞への分化促進について比較した結果、LLC/IL-1β腫瘍においてGFP陽性細胞の著明な浸潤が確認された。次にCD45およびCD31で染色し、GFPとマージし、GFP陽性の細胞を同定した結果、GFP陽性細胞の多くはCD45陽性で血球系細胞であることが判明した。またCD31陽性細胞も、コントロールに比べて約2倍に増えていた。この結果より、LLC/IL-1β腫瘍の血管新生は以前報告したように、浸潤細胞による血管新生因子の過剰分泌だけでなく、骨髄由来細胞の血管内皮細胞への分化促進も関与していることが確認された。2.ヒト胆管癌細胞高播種株UICCT-1/MのcDNAマイクロアレイ解析UICCT-1の高腹腔内播種株(UICCT-1/M)とUICCT-1細胞についてcDNAマイクロアレイの解析を行った。発現増強遺伝子および減弱遺伝子を同定し、浸潤や転移にかかわる遺伝子群を同定した。その結果、UICCT/Mで発現が10倍以上増強している遺伝子として、MMP-1,cAMP dependent protein kinase alpha, MMP-3,IL-1b, Serine proteinase inhibitor member 2,A kinase anchor protein 12,S100 calcium-binding protein A4,inhibin beta A, grazyme K, pentaxin-related gene, IL-8,colony stimulating factor 2,leupaxin, dual specificity phisphatase 2が確認された。またIL-1βの発現は約20倍増強しており増強の程度は3番目に高かった。3.ヒト胆管癌細胞株UICCT-1への遺伝子導入とその効果IL-1β遺伝子を導入したUICCT-1/IL-1βをヌードマウスの腹腔内に転移数の増加の有無および転移巣の大きさについて組織学的に検討した。親株は7匹中1匹にのみ転移を認めたが、UICCT/IL-1β細胞では7匹全部に転移を認め、その個数も増加していた。更に、UICCT/IL-1b細胞においてはMMP-1やIL-8の発現増強が確認された。

1. Analysis of the involvement of bone marrow-derived cells in LLC/lL-1β tumor neovascularization Chimeric mice transplanted with bone marrow cells (1x10^6/mouse) from GFP mice were subcutaneously implanted with IL-1 transgenic Lewis lung cancer cells (LLC/IL-1), and the tumor was removed 10 days later.组织切片与CD45和CD31抗体，血管内皮细胞的标志物，然后与PE一起标记，评估双阳性细胞（GFP和CD45，CD31阳性）细胞的数量，并与双阳性细胞（GFP和CD45，CD45，CD31阳性）的细胞相比，与骨骼差异相比，与双阳性细胞的数量进行了比较。在LLC/IL-1β肿瘤中证实GFP阳性细胞。接下来，将细胞用CD45和CD31染色，与GFP合并，并鉴定出GFP阳性细胞，并发现大多数GFP阳性细胞都是CD45阳性阳性，并且是血细胞遗传学细胞。 CD31阳性细胞的增加也是对照组的两倍。这些结果证实，如前所述，LLC/IL-1β肿瘤的新血管形成不仅参与了浸润性细胞对血管生成因子的分泌，而且还涉及促进骨髓衍生细胞分化为血管内皮细胞的分化。 2。对高度散布的人类胆管癌细胞菌株UICCT-1/M cDNA微阵列分析进行了cDNA微阵列分析，对UICCT-1和UICCT-1细胞的高腹部传播菌株（UICCT-1/M）进行了进行。鉴定出表达增强和衰减基因，并鉴定出参与侵袭和转移的基因。结果，UICCT/M表达超过10倍以上的基因是MMP-1，cAMP依赖性蛋白激酶α，MMP-3，IL-1B，丝氨酸蛋白抑制剂成员2，一种激酶锚固蛋白12，S100钙结合蛋白A4 Leupaxin，双重特异性磷酸蛋白酶2。此外，IL-1β表达增加了约20倍，增强程度是第三高的程度。 3.基因转移到人类胆管癌细胞系UICCT-1及其效应UICTCCT-1/IL-1β，已通过组织学转移了已转移的IL-1β基因的UICCT-1/IL-1β，以期在腹膜内腔中的转移数量增加或不存在转移数量的增加，并且在裸露的小鼠中的转移性局灶性大小。在父母菌株的七个中只有一个观察到转移，但是在所有七个中，所有七个UICCT/IL-1β细胞转移都观察到了转移，这些细胞的数量增加了。此外，在UICCT/IL-1B细胞中证实了MMP-1和IL-8的表达增强。

项目成果

Antitumor immune response by CX3CL1 fractalkine gene transfer depends on both NK and T cells

• DOI: 10.1002/eji.200526042
• 发表时间: 2005-05
• 期刊: European Journal of Immunology
• 影响因子: 5.4
• 作者: H. Xin;T. Kikuchi;S. Andarini;S. Ohkouchi;Takuji Suzuki;T. Nukiwa;Huqun;K. Hagiwara;T. Honjo;Y. Saijo

Gene therapy with secretory leukoprotease inhibitor promoter controlled by replication-competent adenovirus for non-small cell lung

由具有复制能力的腺病毒控制的分泌性白蛋白酶抑制剂启动子对非小细胞肺进行基因治疗

• 发表时间: 2004
• 期刊: Cancer Research 64
• 作者: Maemondo M;Saijo Y et al.
• 通讯作者: Saijo Y et al.