経口ワクチンによる粘膜免疫誘導可能なprime/boostワクチンの開発

开发可使用口服疫苗诱导粘膜免疫的初免/加强疫苗

基本信息

批准号：
16017244
负责人：
保富康宏
金额：
$ 6.53万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017244/
关键词：
粘膜ワクチン経口ワクチン VLP CTL HEV HIV 感染症パラインフルエンザ2型ウイルス

项目摘要

多くの感染症のでは粘膜の免疫反応は重要であり、粘膜の免疫機構は全身的な免疫監視機構と異なる制御を受けていることから粘膜を経由して感染する病原体に対するワクチン開発においては粘膜免疫を誘導することが重要である。我々は過去に経口感染を示すE型肝炎ウイルス(HEV)のウイルス様中空粒子(VLP)を用いてDNAワクチンを経口的に投与すると全身性の免疫反応のみならず粘膜面でも特異的免疫の誘導が可能であることを報告した。本研究では近年注目されているDNAワクチンと遺伝子組み込みリコンビナントワクチンを組み合わせたprime/boostワクチンをこのVLPによるDNAワクチンと呼吸器粘膜に特異的に感染を示し、病原性のきわめて低いヒトパラインフルエンザ2型ウイルスベクター(hPIV2)を用いて粘膜免疫誘導可能なprime/boostワクチンの開発を目的とした。マウスにヒトエイズウイルス(HIV)envまたはgag DNAワクチンをHEVのVLPに封入し、経口投与したところ特異的液性ならびに細胞性免疫反応が粘膜面及び全身的に誘導された。一方hPIV2ではHIVおよびサルエイズウイルス(SIV)遺伝子組み込みベクターを作成した。作成されたPIV2をマウス鼻腔内に接種したところ呼吸器粘膜上皮にHIV蛋白の発現が確認された。また、HIVに対する液性免疫反応では特異的IgGが血清で、IgAが血清ならびに肺胞洗浄液、糞便および膣洗浄液で確認された。また特異的細胞傷害性Tリンパ球(CTL)は脾臓、頚部リンパ節、肺胞洗浄液、パイエル板、腸間膜リンパ節において認められた。さらに、このVLPを用いたDNAワクチンの経口投与とhPIV2による経鼻投与を組み合わせprime/boostワクチンを試みたところ、それぞれ単独で行う以上に高い免疫反応が誘導可能であった。

粘膜免疫反应对于许多传染病很重要，粘膜免疫系统的控制与全身免疫监视机制不同，诱导很重要。我们之前已经证明，当使用可通过口服传播的戊型肝炎病毒（HEV）的病毒样空心颗粒（VLP）口服DNA疫苗时，它不仅会诱导全身免疫反应，还会诱导粘膜特异性免疫。表面上报道说这是可能的。在这项研究中，我们使用了近年来备受关注的DNA疫苗和基因整合重组疫苗相结合的初免/加强疫苗，以及使用VLP的DNA疫苗和特异性感染人副流感2型疫苗。我们的目标是开发一种可以使用病毒载体（hPIV2）诱导粘膜免疫的初免/加强疫苗。当人类艾滋病病毒 (HIV) env 或 gag DNA 疫苗封装在 HEV VLP 中并给小鼠口服给药时，在粘膜表面和全身诱导了特异性体液和细胞免疫反应。另一方面，对于 hPIV2，我们创建了整合 HIV 和猿猴艾滋病病毒 (SIV) 基因的载体。当将创建的PIV2接种到小鼠鼻腔中时，在呼吸道粘膜上皮中证实了HIV蛋白的表达。此外，在针对HIV的体液免疫反应中，在血清、肺泡灌洗液、粪便和阴道灌洗液中检测到特异性IgG和IgA。在脾脏、颈部淋巴结、肺泡灌洗液、派尔氏集结和肠系膜淋巴结中也观察到特异性细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL)。此外，当我们尝试使用这种 VLP 口服 DNA 疫苗和 hPIV2 鼻腔给药相结合的初免/加强疫苗时，我们能够比单独使用任何一种疫苗诱导更高的免疫反应。