血島を構成する未分化中胚葉細胞からの血管内皮・血球細胞の発生機構

构成血岛的未分化中胚层细胞的血管内皮和血细胞的发育机制

基本信息

批准号：
15039205
负责人：
依馬正次
金额：
$ 1.6万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15039205/
关键词：
発生・分化発現制御再生医学遺伝子循環器

项目摘要

1)血島を構成する中胚葉細胞群の細胞系譜の解明マウス胚の血島を構成する中胚葉細胞群は血球と血管内皮細胞に分化すると示唆されているものの未だ明確な証明はなされていない。血島を構成する細胞群の分化能を、遺伝子改変マウス由来のマウス胎児を用いた移植実験系により解析する。現在までめ所、GATA-1プロモーター下にGFPを発現し、全身の細胞でlacZを発現するマウスを樹立してきており、今後移植実験により、血島を構成する細胞の分化能を検討していく。2)血球分化、血管内皮分化におけるFlk1およびGATA-1遺伝子の機能解析血球前駆細胞におけるFlk1遺伝子の発現消失が血球への分化に必要であるかどうか検討するために、GATA-1プロモーター(血島および血球細胞で発現)下にFlk1を発現させるトランスジェニックマウスを2ライン作製した。マウス8日胚の血球前駆細胞を血球コロニーアッセイ法により定量し、その効果を検討したが、その数に変化は認められなかった。一方、血管内皮前駆細胞におけるGATA-1遺伝子の発現消失が血管内皮細胞への分化に必要であるか検討するため、全身においてGATA-1を発現させるマウスを作製した。今後、血管内皮の分化が正常に起こっているか、異所的な造血が認められるかどうか検討していく。3)血島において特異的に発現する新規遺伝子の単離血島において特異的に発現する新規の遺伝子を単離するため、マイクロアレイ法などにより、新規の遺伝子群を単離していく。現在、マイクロアレイの結果を解析中である。

1) 阐明构成血岛的中胚层细胞的细胞谱系尽管有人提出构成小鼠胚胎血岛的中胚层细胞分化为血细胞和血管内皮细胞，但尚未提供明确的证据.构成血岛的细胞群的分化潜力将通过移植实验系统进行分析，该系统使用来自转基因小鼠的小鼠胎儿。迄今为止，我们已经建立了在全身细胞中在 GATA-1 启动子和 lacZ 控制下表达 GFP 的小鼠，我们将使用移植实验来检查构成血岛的细胞的分化潜力。 2）Flk1和GATA-1基因在血细胞分化和血管内皮分化中的功能分析我们产生了表达Flk1（在血细胞和血细胞中表达）的两个转基因小鼠品系。通过血细胞集落测定对8日龄小鼠胚胎中的血细胞祖细胞进行定量并检查效果，但没有观察到数量变化。另一方面，为了检查血管内皮祖细胞中 GATA-1 基因表达的丧失是否是分化为血管内皮细胞所必需的，我们培育了全身表达 GATA-1 的小鼠。未来我们将研究血管内皮分化是否正常发生以及是否观察到异位造血。 3) 血岛特异性表达的新基因的分离为了分离血岛特异性表达的新基因，我们将使用微阵列方法分离新的基因组。我们目前正在分析微阵列结果。