ヒスチジンキナーゼ共役型受容体を介した環境応答の分子機構

组氨酸激酶偶联受体介导的环境反应的分子机制

基本信息

  • 批准号:
    12142204
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 23.23万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2004
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

【1】大腸菌走化性受容体は刺激受容後にメチル化・脱メチル化されて脱感作=適応を起こす.我々は,脱メチル化酵素CheBが細胞の極に局在すること,その標的は受容体と複合体を形成するHisキナーゼCheAであることを示した.これは,すでに報告したメチル化酵素CheRの局在機構と全く異なる点で興味深い.また,メチル化による局在制御の可能性についても検討した.その結果,受容体の局在はメチル化によりわずかではあるが有意に促進されることが示された(投稿中).一方,CheBの局在はメチル化により顕著に促進された.これがCheBのリン酸化によることも示唆された(投稿準備中).すなわち,走化性蛋白質の局在が制御されている可能性が初めて示された.また,受容体局在の一細胞連続観察も行った.【2】細胞極における走化性受容体のクラスター形成が効率よいシグナル伝達に重要と推定されている.我々は,S-S架橋を用いた解析から,受容体ダイマー間相互作用を初めて検出し,それがシグナル伝達に関係することを示している.この系を発展させ,クラスター内でのダイマー間の配向を推定した.さらに,受容体メチル化によって,ダイマー間の配向が変化すること,誘引物質の影響も著しく低下することが示された.これは,メチル化によるシグナル入出力関係の調節を示唆するもので,シグナル伝達機構の解明へ向けて大きな成果である(投稿準備中).【3】コレラ菌には走化性(Che)蛋白質が複数セット,受容体は45存在する.各Cheシステムの働きを調べるため,応答調節因子CheYのホモログ5種をクローン化して機能解析を行った.その結果,CheY3のみが走化性に関与することが示された(投稿中).また,誘引物質として10種類のアミノ酸などを同定し,一部については受容体を同定した(投稿準備中).これらの解析から走化性と病原性の関連も示唆されている.
[1]大肠杆菌趋化受体是甲基化的,并在刺激接收后被脱甲基化,导致脱敏=适应。我们表明,脱甲基酶Cheb定位于细胞的杆子,其靶标是他的激酶CHEA,它与受体形成复合物。这很有趣,因为它与先前报道的甲基酶Cher的定位机理完全不同。我们还检查了通过甲基化来控制定位的可能性。结果,由于甲基化,受体定位很小。结果,由于甲基化,受体的定位很小。但是,它被证明是显着促进的(在发布中)。同时,CHEB的定位通过甲基化显着促进。还建议这是由CHEB(在发布)的磷酸化引起的。换句话说,首次可以调节趋化蛋白的定位。我们还对一个受体的细胞定位进行了连续观察。 [2]假定在细胞极点趋化受体的簇形成对于有效的信号传导很重要。我们使用了S-S交联。分析表明,第一次检测到受体二聚体之间的相互作用,并且与信号传导有关。我们开发了该系统,并估算了群集内的二聚体之间的方向。此外,结果表明,受体甲基化会改变二聚体和吸引剂的作用之间的方向显着降低。这表明对甲基化引起的信号输入/输出关系的调节,这是阐明信号转导机制的重大成就(为发布准备)。 3)B。CholeraeB.有多种趋化(CHE)蛋白,45个受体B.有45个受体。为了研究每个CHE系统的功能,将响应调节剂CHEY的五个同源物克隆,并进行功能分析。结果,证明只有Chey3参与趋化性(邮政)。另外,将10种类型的氨基酸鉴定为吸引剂,并鉴定出一些受体(在发布中)。这些分析表明,还提出了趋化性和致病性之间的关系。

项目成果

期刊论文数量(22)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Shiomi, D. et al.: "Dual recognition of the bacterial chemoreceptorby chemotaxis-specific domains of the CheR methyltransferase"The Journal of Biological Chemistry. 277・44. 42325-42333 (2002)
Shiomi,D.等人:“CheR甲基转移酶的趋化特异性结构域对细菌化学感受器的双重识别”生物化学杂志277·44(2002)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Uemura, T., Matsumoto, Y., Ohnishi, K., Homma, M., Kawagishi, I.: "Sensing of cytoplasmic pH by bacterial chemoreceptors involves the linker region that connects the membrane-spanning and the signal-modulating"J. Biol. Chem.. 277(2). 1593-1598 (2002)
Uemura, T.、Matsumoto, Y.、Ohnishi, K.、Homma, M.、Kawagishi, I.:“细菌化学感受器对细胞质 p​​H 值的感知涉及连接跨膜和信号调节的连接区域”J
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Banno, S.et al.: "Targetiong of the chemotaxis methylesterase/deamidase CheB to the polar receptor-kinase cluster in an Escherichia coli cell"Molecular Microbiology. (in press). (2004)
Banno, S.等人:“趋化甲酯酶/脱酰胺酶 CheB 靶向大肠杆菌细胞中的极性受体激酶簇”分子微生物学。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Harshey, R.M.et al.: "Function, diversity, and evolution of signal transduction in prokaryotes."Developmental Cell. 4・4. 459-465 (2003)
Harshey,R.M. 等人:“原核生物信号转导的功能、多样性和进化”。发育细胞,459-465。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
リポソーム応用の新展開〜人工細胞の開発に向けて〜(うち「膜を介したシグナル伝達」を分担執筆)(秋吉一成, 辻井薫 監修)
脂质体应用的新进展 - 迈向人工细胞的开发 - (合着《膜介导的信号转导》)(监督:秋吉一成、辻井薰)
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    坂野聡美;川岸郁朗
  • 通讯作者:
    川岸郁朗
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    鈴木 大介;伊東 靖晃;百武 晃宏;本間 道夫;川岸 郁朗;高田彰二
  • 通讯作者:
    高田彰二
蛍光タンパク質を用いた好アルカリ性細菌Bacillus pseudofirmus OF4株の電位駆動型Naチャネルの可視化
使用荧光蛋白对嗜碱细菌拟坚韧芽孢杆菌 OF4 菌株中电压驱动的 Na 通道进行可视化
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    藤浪 俊;佐藤 孝子;Terry A.Krulwich;川岸 郁朗;伊藤 政博
  • 通讯作者:
    伊藤 政博
好アルカリ性Bacillus pseudofirms OF4株の電位駆動型NaチャネルNa_vBPは極においてメチル基受容走化性蛋白質と共局在する
嗜碱芽孢杆菌假菌菌株 OF4 的电压驱动 Na 通道 Na_vBP 与两极接受甲基的趋化蛋白共定位。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    藤浪 俊;佐藤 孝子;Terry A.Krulwich;川岸 郁朗;伊藤 政博
  • 通讯作者:
    伊藤 政博
好アルカリ性細菌Bacillus pseudofirmus OF4株の電位駆動型Naチャネルの細胞内局在と走化性
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
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    0
  • 作者:
    伊藤 政博;藤浪 俊;佐藤 孝子;Tdrry A.Krulwich;川岸 郁朗
  • 通讯作者:
    川岸 郁朗
大腸菌における走化性受容体の動きと細胞骨格タンパク質の関与の検討
检查大肠杆菌中趋化受体的运动和细胞骨架蛋白的参与
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    坂野 聡美;石島 秋彦;本間 道夫;川岸 郁朗
  • 通讯作者:
    川岸 郁朗

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