PCNA・plutonium遺伝子発現制御と染色体ドメイン境界領域結合因子

PCNA/钚基因表达调控和染色体结构域边界区域结合因子

• 批准号: 08274225
• 负责人: 山口 政光
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08274225/
• 关键词: PCNA; ショウジョウバエ; 転写調節エレメント; 染色体ドメイン; 転写因子; 遺伝子導入動物

1)PCNA遺伝子プロモーター内のBEAF結合サイト様配列(-87〜-62)に結合するタンパク因子は、その認識配列の特異性からBEAFと同一のものであると予想し、ゲルシフトアッセイにおいて抗BEAF抗体を用いたスーパーシフトアッセイを行なったが、予想に反して抗体添加の効果は認められなかった。この因子は少なくとも2種類の塩基配列を認識し、PCNA遺伝子の-87〜-62領域以外にもDREやURE領域、DNAポリメラーゼα遺伝子のDRE、さらにはDREF(DRE結合因子)遺伝子プロモーター内の複数の領域にも親和性を示すことが明らかとなった。私たちはこの因子をCFDD(common regulatory factor for DNA replication genes and DREF gene)と名づけた。2)PCNAプロモーター内のCFDD結合サイトに変異を導入したPCNA-lacZ融合遺伝子を用いてトランスジェニックフライの系統を複数樹立し、各発生段階におけるlacZ発現レベルの定量を行った結果、このサイトがPCNAプロモーター活性を促進する機能をもつことがわかった。

1）我们预测，PCNA基因启动子中与BEAF结合位点样序列（-87至-62）的蛋白质因子与BEAF相同，因为其识别序列的特异性以及使用抗Beaf抗体的超速度测定在凝胶转移测定中进行了抗体，但相反，对Antiffications Antections Antect castect a antbody却没有效应。该因素识别至少两种类型的核苷酸序列，并且已显示出除PCNA基因的-87-62区域以及DRE和URE区域，DNA聚合酶α基因的DRE以及DREF（DRE结合因子）基因基因启动者外，还显示出亲和力。我们命名了此因子CFDD（DNA复制基因和DREF基因的常见调节因子）。 2）使用PCNA-LACZ融合基因建立了多个转基因蝇菌株，其中突变被引入PCNA启动子内的CFDD结合位点，并在每个发育阶段定量定量LACZ表达水平，并且发现该部位有能力促进PCNA启动子活性。

项目成果

山口政光: "DNA複製・修復と発癌" 羊土社, 11 (1996)

山口正光：“DNA 复制/修复和癌变” Yodosha，11 (1996)

Yamaguchi,M.et al.: "Roles of multiple promoter elements of the proliferaring cell ……" Genes to Cells. 1. 47-58 (1996)

Yamaguchi, M. 等人：“增殖细胞的多个启动子元件的作用……”Genes to Cells。 1. 47-58 (1996)

Takahashi,Y.et al.: "DNA replication-related elements cooperate to enhance ……" J.Biol.Chem.271. 14541-14547 (1996)

Takahashi, Y. 等人：“DNA 复制相关元件协同增强……”J.Biol.Chem.271（1996）。

Yamaguchi,M.et al.: "Expression patterns of DNA replication enzymes and the ……" Biol.Cell. 85. 147-155 (1996)

Yamaguchi, M. 等人：“DNA 复制酶的表达模式和……”Biol.Cell 85. 147-155 (1996)

Ryu,J.-R.et al.: "Transcriptional regulation of the Drosophila raf protooncogene" Nucleic Acids Res.(in press). (1997)

Ryu,J.-R.等人：“果蝇 raf 原癌基因的转录调控”核酸研究（出版中）。