ミトコンドリアF_0F_1‐ATPaseの活性調節タンパク質と雄性配偶子

线粒体F_0F_1-ATP酶活性调节蛋白与雄配子

基本信息

批准号：
08273212
负责人：
關谷次郎
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)テッポウユリを用いてミトコンドリアATPase活性が最も高い花粉と最も低い球根を材料にして、亜ミトコンドリア粒子(SMP)を調整してそのリン脂質組成を検討したところ,花粉と球根の分子種組成は異なっていた。(2)ATPaseの阻害タンパク質が2種類(インヒビターIおよびII)存在することを見いだし,それぞれを電気泳動的に単一に精製した.インヒビターIは分子量が16000,IIは8000であることを明らかにした.(3)インヒビターIおよびIIのN末端アミノ酸配列を決定した.その結果いずれも新規ペプチドであった.(4)インヒビターIの抗体を用いて部位別の存在を検討し,インヒビターIは球根に最も多く,花粉にはわずかしか存在しないことを明らかにした.また球根が発芽し始めるとこのインヒビターIは減少しはじめ,発芽7日目にはほとんど消失した.(5)これらの結果,球根や葉などの器官,組織ではF_0F_1‐ATPaseは阻害タンパク質の存在によってその活性が抑制された状態で機能しているが,雄性配偶体(花粉)では阻害タンパク質のない最大活性の状態で機能していると考えられる.さらに膜のリン脂質組成の違いもこれらの活性調節に関与していることが推定される.今後この阻害タンパク質の遺伝子を単離し,雄性配偶体(花粉)で発現させることによって,この阻害タンパク質の機能と雄性配偶体の機能の関連について検討していく予定である.

（1）当我们使用具有最高线粒体ATPase活性的花粉和线粒体ATPase活性最低的灯泡作为材料时，我们使用了clisbochochochondrial颗粒（SMP）来检查其磷脂组成，并发现花粉和鳞茎的分子物种组成有所不同。（2）我们发现存在两种类型的ATPase抑制剂蛋白（抑制剂I和II），并且每一种都以单个电泳方式纯化电泳。抑制剂I的分子量为16,000，II为8,000。（3）确定抑制剂I和II的N末端氨基酸序列。结果，两者都是新型肽。（4）我们使用抑制剂I抗体研究了每个位点的存在，并揭示了抑制剂I在鳞茎中最常见，在花粉中只有少数。此外，随着灯泡开始发芽，抑制剂我开始减少。它在发芽的第七天几乎消失了。（5）结果，F_0F_1-ATPase在器官和组织（例如鳞茎和叶）中起作用，但是在男性配子体（花粉）中，人们认为它在没有抑制蛋白的最大活性中起作用。还估计，膜磷脂组成的差异也参与了这些活性的调节。将来，我们将通过分离该抑制蛋白的基因并在雄性配子体（花粉）中表达这种抑制蛋白的功能与雄性配子体的功能之间的关系。