転写制御因子IRF-1,-2による造血幹細胞の分化・増殖制御及び白血病発症の解析

转录调节因子IRF-1和-2对造血干细胞分化和增殖控制以及白血病发展的分析

基本信息

批准号：
08261209
负责人：
田中信之
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

インターフェロン系の転写活性化因子IRF-1の機能解析から、IRF-1が癌抑制遺伝子として機能する事、アポトーシスの制御に重要である事を明らかにした。更に、IRF-1遺伝子が白血病・MDS(myelodysplastic syndrome)で頻繁に欠損のみられる染色体5q31.1にマップされ、多くの白血病・MDS症例でのIRF-1遺伝子の欠損・負活性化及びIRF-1遺伝子の発現異常を見い出し、IRF-1が白血病・MDS発症に関与している事が強く示唆された。そこで、IRF-1の癌化における役割、特に細胞周期の制御にどう関っているかを解析するため、IRF-1欠損胎児線維芽細胞(EF)のX線照射、抗癌剤投与によるDNA損傷時の細胞周期の変化を、野生型およびp53欠損EFと比較、検討を行つ結果、野生型EFではG1停止が認められたが、IRF-1欠損EFではp53欠損EFと同様に細胞周期の停止が認められなかった。更に、野生型EFとは対照的に、CDK2、CDK4活性はIRF-1、p53欠損EFでともに抑制されないことが判明し、IRF-1はCK1の発現制御に関与していると推測された。そこで現在知られている全てのCDK抑制因子の発現を検討した結果、p21の発現のみがIRF-1欠損EF及びp53欠損EFで低下しており、またDNA損傷による発現誘導も認められなかった。さらにp21のプロモーターにはp53結合部位の他、IRF結合部位に類似した配列が存在すること、p21遺伝子プロモーターがIRF-1及びp53によって協調的に活性化されることを見出した。この様な癌抑制機能をもつ転写活性化因子の協調作用を見出したことは始めてであり、現在造血系腫瘍の発生メカニズムについて検討している。

基于干扰素的转录激活剂IRF-1的功能分析表明，IRF-1是肿瘤抑制基因的作用，对于控制凋亡非常重要。此外，将IRF-1基因映射到5q31.1染色体，该基因在白血病和MD（骨髓质质综合征）上经常缺乏，并在许多白血病和MDS中的IRF-1基因表达中发现了IRF-1基因的缺陷，IRF-1基因的阴性激活和异常表达涉及IRF的发展。 Therefore, to analyze the role of IRF-1 in cancer development, and in particular how it relates to cell cycle regulation, we compared and examined changes in cell cycle during DNA damage caused by X-ray irradiation and anticancer drug administration of IRF-1-deficient fetal fibroblasts (EFs) and examined the changes in cell cycle during DNA damage due to X-ray irradiation and anticancer drug administration, and found that G1 arrest was observed in wild-type EFS，但在IRF-1缺陷的EFS中，没有以与p53缺陷型EFS相同的方式观察到细胞周期停滞。此外，与野生型EF相比，发现CDK2和CDK4活性在IRF-1和p53缺陷型EF中都没有压制，并且推测IRF-1参与CK1表达的调节。因此，我们研究了所有当前已知的CDK抑制剂的表达，发现仅在IRF-1缺陷EF和p53缺陷型EF中只能降低P21的表达，并且没有观察到由于DNA损伤引起的表达。此外，除了p53结合位点外，还发现p21启动子包含类似于IRF结合位点的序列，并且P21基因启动子由IRF-1和P53协调。这是我们第一次发现具有癌症抑制功能的转录激活剂的协调效果，目前我们正在研究造血肿瘤发育的机制。