フリップ-フロップを介した物質輸送

通过人字拖进行大众运输

基本信息

批准号：
07276203
负责人：
小林俊秀
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

フリッパーゼは膜を横切る脂質の移動を触媒するタンパク質である。動物細胞形質膜にはホスファチジルセリンに特異性の高いフリッパーゼが存在していることが知られている。フリッパーゼの機能は分かっていない。我々は培地に加えたホスファチジルセリンがフリッパーゼを介して細胞へと取り込まれることを示唆するデータを得ている(Kobayashi,T.and Arakawa,Y.(1991)J.Cell Biol.113,235-244)。最近我々は高濃度のホスファチジルセリンには細胞毒性があることを見いだした。細胞毒性はホスファチジルセリンに特異的なものでありホスファチジルコインは毒性を示さない。ホスファチジルセリンに特異的な細胞毒性はホスファチジルセリンに特異的な、フリッパーゼを介した脂肪への取り込みに起因するものであることが予想された。そこで変異剤処理したCHO細胞からホスファチジルセリンに耐性の変異株を取得し、細胞表面のフリッパーゼ活性を測定したところ、得られた変異株の40%で活性の低下が見られた。次に変異株での高分子の取り込みについてHorseradish peroxidase(HRP)を用いて測定したところ、取り込み活性は親株の半分程度に減少していた。一方低比重リポタンパク質(LDL)の取り込みは親株と変異株の間で大きな差はなく、フリッパーゼは液性のエンドサイトーシスに関与していることが示唆された。

Flippases是催化脂质转移跨膜的蛋白质。众所周知，在动物细胞的质膜中存在具有高特异性的磷脂酰丝氨酸特异性的氟酶。 Flippase的功能未知。我们获得了数据，表明将磷脂酰丝氨酸添加到培养基中，通过Flippase（Kobayashi，T。和Arakawa，Y。）将其吸收到细胞中。（1991）J。Cell Biol。113，235-244）。最近，我们发现高浓度的磷脂酰丝氨酸是细胞毒性的。细胞毒性是针对磷脂酰丝氨酸的特异性，磷脂酰螺旋素无毒。预计磷脂酰丝氨酸特异性细胞毒性是由于磷脂酰丝氨酸特异性，Flippase介导的脂肪掺入脂肪所致。因此，从用突变剂处理的CHO细胞中获得了抗磷脂酰丝氨酸的突变菌株，当测量细胞表面Flippase活性时，在获得的突变菌株的40％中降低了活性。接下来，当使用辣根过氧化物酶（HRP）测量突变株中聚合物的摄取时，摄取活性降低到父母菌株的一半。另一方面，母体和突变菌株之间的低密度脂蛋白（LDL）摄取没有显着差异，这表明Flippases参与体液内吞作用。