サイトカイン遺伝子導入とSCIDマウスを用いた抗腫瘍効果の研究

利用细胞因子基因转移和 SCID 小鼠进行抗肿瘤作用的研究

基本信息

批准号：
06282244
负责人：
岡田全司
金额：
$ 12.61万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.(IL-6遺伝子+bc1-2遺伝子)導入T細胞の生体内移入実験により、キラーT活性を保持したままの長期生存を可能にするadoptive transferの画期的モデルを確立した。一方IL-6遺伝子欠損+bc1-2遺伝子欠損マウスではキラーTの分化誘導等は認められなかった。2.アデノウイルスベクターに導入したIL-6遺伝子+IL-6R遺伝子+gp130遺伝子を担癌マウスに生体内投与し延命相乗効果を認めた。この三者の遺伝子を自己のヒト癌が生着したSCID-PBL/huに投与し、相乗的ヒ・キラーT分化誘導を示した。このキラー活性は自己のヒト癌にのみ特異的であることを明らかにした。3.IL-6欠損患者を初めて見出し、この患者ではキラーT分化が全く認められないことを示した。(IL-6+IL-7)double transgenic(Tg)マウス及び(IL-6+β-IFN)double Tgマウスのリンパ球は長期生存とキラーT分化増強・抗腫瘍増強作用を示した。(GM-CSF+IL-6)、(IL-6+TFNα)、(IL-6+IL-2+γIFN)、遺伝子組み合わせや(G-CSF+IL-6)double Tg SCIDマウスでヒト癌やマウス癌に対する抗腫瘍相乗効果を得た。5.ヒト免疫応答を解析する良い生体モデルが確立していなかったがSCID-PBL/huを作製し、今まで非常に困難であったヒト癌特異的キラーT細胞のin vivoでの分化誘導を介する抗ヒト癌効果(延命効果、腫瘍腿縮効果、癌転移抑制効果)を高い再現率を持って(ほぼ100%)発揮しうる系を初めて我々は確立した。このモデル動物で誘導された自己癌にキラー活性を示すヒトCD3^+CD8^+キラーT細胞の特異性は、それぞれの自己癌特異抗原に対して間違いなく発揮されることを多数(30種以上)のヒト癌細胞を用いて明らかにした。又、本モデルはヒト癌特異的ヒトキラーT細胞の極めて強力な生体内分化誘導に画期的な手法を提供するものと思われる。

1.通过（IL-6基因+bc1-2基因）转染T细胞的体内转移实验，我们建立了一种创新的过继转移模型，可以在保留杀伤T细胞活性的同时实现长期存活。另一方面，在IL-6基因缺陷+bc1-2基因缺陷小鼠中没有观察到杀伤性T分化的诱导。 2.将IL-6基因+IL-6R基因+gp130基因导入腺病毒载体，给予荷瘤小鼠体内，观察到对生存延长的协同作用。将这三种基因给予移植有自体人类癌症的SCID-PBL/hu，并证明了Hi-killer T分化的协同诱导。研究表明，这种杀手活性仅针对人类自体癌症。 3.我们首次发现了一名IL-6缺乏症患者，并表明该患者根本没有观察到杀伤性T分化。来自(IL-6+IL-7)双转基因(Tg)小鼠和(IL-6+β-IFN)双Tg小鼠的淋巴细胞显示出长期存活并增强的杀伤T分化和抗肿瘤活性。 (GM-CSF+IL-6)、(IL-6+TFNα)、(IL-6+IL-2+γIFN)、基因组合和(G-CSF+IL-6)双Tg SCID小鼠抗肿瘤协同作用。获得了抗小鼠癌症的效果。 5. 虽然尚未建立良好的分析人体免疫反应的生物学模型，但我们创建了SCID-PBL/hu，并成功在体内诱导人类癌症特异性杀伤T细胞的分化，这对于目前来说是极其困难的。我们首次建立了一个系统，可以通过人类肿瘤以高再现性（接近100％）表现出抗人类癌症效果（延长寿命效果、肿瘤缩小效果、抑制癌症转移效果）。使用人类癌细胞清楚地证明了人类 CD3^+CD8^+ 杀伤性 T 细胞对在该模型动物中诱导的自身癌症表现出杀伤活性的特异性。此外，该模型有望为人类癌症特异性杀伤T细胞的极其强大的体内分化诱导提供一种创新方法。