優れた抗腫瘍効果を発揮する再生T細胞療法実現のための新規T細胞分化系の開発

开发新型T细胞分化系统，实现具有优异抗肿瘤效果的再生T细胞疗法

• 批准号: 22K15580
• 负责人: 早稲田 真澄
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15580/
• 关键词: 免疫再生治療; キラーT細胞; 3次元培養; Notchシグナル; iPS由来間葉系細胞(iMSC); ヒトiPS細胞; T細胞分化; 3次元培養法; ヒト間葉系細胞

本研究の目的は、優れた抗腫瘍効果を発揮する再生T細胞療法を実現するために、がん細胞を殺傷する能力を有するキラーT細胞と抗腫瘍効果を高める役割を有するヘルパーT細胞を、ヒトiPS細胞から誘導できるT細胞分化系を開発することである。予備検討の段階では、iPS細胞から神経堤細胞(Neural Crest Cell, NCC)と呼ばれる中間細胞を作製した上でNotch受容体のリガンドを遺伝子導入し、導入後の細胞を更に分化させることでT細胞分化を支持するフィーダー細胞として間葉系細胞(iPS-derived Mesenchymal Stromal Cell, iMSC)を得ていた。しかし、当該方法では遺伝子導入後に毎回Notchリガンドの発現レベルを確認する必要があったため、Notchリガンドを導入したiPS細胞を用いることで省力化できるかどうかを検討した。その結果、Notchリガンドの発現量に依存して分化が遅れるものの、無事iPS細胞からiMSCを誘導できることが確認出来た。これによりNotchリガンド発現iPS細胞を一度樹立してしまえば、iMSC分化ロット毎にNotchリガンドの発現レベルを確認する必要なく、研究を実施できるようになった。このiMSCを用いてT細胞分化を実施したところ、培養3週間程度でαβ型T細胞受容体(T Cell Receptor, TCR)を発現するCD4/CD8両陽性細胞が分化し、8週間程度でαβ型TCRを発現するキラーT細胞を得る事ができた。これまでの分化法では、予めαβ型TCRを導入したiPS細胞を用いる必要があったため単一のTCR発現T細胞しか誘導できなかった。当該TCRの多様性を確かめる必要性はあるものの、本法により複数のTCRを発現するキラーT細胞集団が分化可能になれば、任意の抗原を認識するTCRの取得に応用できるかも知れないと考えている。

这项研究的目的是开发一种T细胞分化系统，该系统可以得出杀伤的T细胞，该系统具有杀死癌细胞和助手T细胞的能力，这些细胞具有增加抗肿瘤效应（从人IPS细胞）的作用，以实现再生T细胞疗法，从而施加出色的抗肿瘤作用。在初步研究期间，从IPS细胞中产生称为神经Crest细胞（NCC）的中间细胞，然后用配体转染Notch受体，并使用引入后的细胞进一步分化来获得间充质细胞（IPS衍生的中质质子层流细胞（IMSCS），以支持每个nightig nightig nightig note note note note note nordig note noctig。在基因转移之后，我们研究了使用Notch配体引入的IPS细胞是否可以减少劳动力，但确认分化会根据Notch配体的表达水平而延迟，但可以成功地诱导IMSS的IMS级别的IGS级别。 IMSC分化批次使用这些IMSC进行T细胞分化时，表达αβT细胞受体（TCR）的CD4/CD8阳性细胞在培养的大约3周内进行了分化，并且可以在8周内获得表达αβTCR的杀手T细胞。以前的分化方法需要使用以前引入αβ型TCR的IPS细胞，因此只能诱导单个表达TCR的T细胞。尽管有必要确认TCR的多样性，但我们认为，如果这种方法使表达多个TCR的杀手T细胞种群有可能区分，则可能适用于识别任何抗原的TCR。