小脳シナプス可塑性における一酸化窒素拡散による情報伝達様式の機能

一氧化氮扩散信息传递模式在小脑突触可塑性中的作用

• 批准号: 06260216
• 负责人: 澁木 克栄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06260216/
• 关键词: 一酸化窒素; 化学発光; 長期抑圧; プルキンエ細胞; 登上線維; ルミノール; CO合成酵素; 一酸化炭素; 一酸化窒素; 化学発光; 長期抑圧; プルキンエ細胞; 登上線維; ルミノール; CO合成酵素; 一酸化炭素

我々は小脳LTDにおいてNOが促進的に作用することを見いだした。また実際に放出されるNOを電気化学的に測定することに成功した。しかしこのNOがいかなる細胞からどのように放出されるかは明らかでない。細胞レベルでのNOの放出を解析するためには単一細胞から放出される微量なNOを検出する極めて高感度なNOの測定法が必要である。このため電気化学的検出法以外の光化学的検出法などの応用を考える必要がある。光化学的なNOの検出法としてはNOがH_2O_2と反応して生成されるperoxynitriteがluminolを酸化するときに生ずる青い光を出す反応が知られている。我々はガラスピペットの先端を薄いゴム膜で閉じた中にluminolとH_2O_2の混合液を送り込み、ピペットの先端をNO溶液に漬けたときの発光をphoton counting法で捉えた。未だ感度、時間応答などの点において電気化学的な方法に劣っているが、今後の改良が期待される。最近、海馬LTPにおいてCOが関与するとの報告がある。CO合成酵素は小脳プルキンエ細胞において高濃度で存在することが知られている。従って小脳LTDにおいてもCOが関与している可能性がある。小脳LTDに対するCO合成酵素阻害剤の効果をみたところLTDは阻害されず、むしろ促進される傾向があった。外来性のCOを投与しつつLTDを起こすとむしろ抑制された。COが真に神経系における情報伝達物質として作用するか否かということを検討するためにはCOが刺激によって放出されるということをみなければならない。我々の開発したNOの電気化学的プローブは酸化されやすいガス状の物質であればこれをNOと同様に捉えることが期待される。従ってNO電極に対するCOの感受性を解析したところCOに対して幾分のクロストークを示した。薬理学的な実験から推定されるCOの放出レベルは10nM以上なので、現在これを検出するべく検討中である。

我们发现Cerebellar Ltd没有晋升。此外，我们已经成功地测量了实际释放的电化学测量。但是，尚不清楚如何从任何单元中释放出来。为了分析在细胞水平上NO的释放，需要一种非常灵敏的测量NO的方法，该方法检测到从单个细胞中释放的痕量NO。因此，必须考虑除电化学检测方法以外的光化学检测方法等应用。作为检测NO的光化学方法，众所周知，当过氧亚硝酸盐与H_2O_2反应氧化Luminol时，发出蓝光的反应发生。我们将Luminol和H_2O_2的混合物与用薄橡胶膜封闭的玻璃移液管中，当将移液器浸入无溶液中时，通过光子计数方法捕获了移液器的发射。尽管从灵敏度和时间响应方面，它仍然不如电化学方法，但预计未来的改进。最近，有报道称CO参与了海马LTP。已知CO合酶存在于小脑Purkinje细胞中的高浓度。因此，CO也可能参与Cerebellar Ltd。当我们研究CO合酶抑制剂对小脑有限公司的影响时，没有抑制，而是倾向于促进。实际上，当有限公司在管理外CO时开发LTD时，它被抑制了，以检查CO是否真正充当神经系统中的信号传感器，我们必须研究刺激的CO释放。期望我们开发的NO的电化学探针可捕获易于氧化为NO的相同气态物质。因此，分析了CO对NO电极的敏感性并显示了与CO的串扰。从药理学实验估计的CO释放水平高于10 nm，目前正在研究中以检测到这一点。