Molecular mechanisms of Ca^<2+> uptake by sarcolipin in cardiac sarcoplasmic reticulum.

心脏肌浆网肌磷脂摄取Ca ^ 2 的分子机制。

基本信息

  • 批准号:
    16500269
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 2006
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

The aim of the study was to explore the role of Ca^<2+> handling-related protein, sarcolipin (SLN) for the regulation of intracellular Ca^<2+> concentration. Sarcoplasmic reticulum (SR)(SERCA2a) is regulated by phospholamban (PLB) and SLN which couple with SERCA2a. Both non-phosphorylated-PLB and -SLN decrease the Ca^<2+> uptake rate of SR. We overexpressed SLN in ventricular muscles of mouse (SLN-TG) and investigated how SERCA2a is influenced by SLN. We measured the Ca^<2+> transients and contraction in intact left ventricular papillary muscles of mouse using the aequorin method. Also, we used saponin-treated thin trabeculae to investigate Ca^<2+> uptake, Ca^<2+> release and Ca^<2+> leakage. In twitch contraction, Hz, the peaks of the Ca^<2+> transient and contraction in SLN-TG were lower than those of the control. The rate of decline of the Ca^<2+> transient and tension was slower than that of the control. In the skinned fiber, Ca^<2+> was loaded in the SR in the presence of ATP and Ca^<2+> (pCa 6.2) for various periods, and Ca^<2+> in the SR was released by caffeine. We measured the released Ca^<2+> with fluo-3. The rate of Ca^<2+> uptake in SLN-TG was slower when the Ca^<2+> loading time was short but no difference was observed when the loading time was longer. The maximal Ca^<2+> content of SR at a steady state in both TG and non-TG cardiac muscles did not differ. Ca^<2+>-induced Ca^<2+> release (CICR) in SLN-TG did not differ from that in non-TG. Ca^<2+> leakage was estimated by measuring the leaked Ca in the solution without ATP and Ca^<2+> after Ca^<2+> loading. Ca^<2+> leakage in SLN-TG was not different from that in non-TG. Thus, SLN decreases the Ca^<2+> uptake in SR and influences intracellular Ca^<2+> concentration. The role of SLN is significant in beat-to-beat contraction, but SLN does not play a significant role at a steady state.
该研究的目的是探讨CA^<2+>处理相关蛋白,肌磷脂(SLN)的作用,以调节细胞内Ca^<2+>浓度。肌质网(SR)(SRCA2A)受磷团(PLB)和SLN的调节,这些夫妇与SERCA2A。非磷酸化-PLB和-SLN都降低了SR的Ca^<2+>摄取率。我们在小鼠的心室肌肉(SLN-TG)中过表达SLN,并研究了SERCA2A如何受SLN的影响。我们使用Aequorin方法测量了小鼠完整的左心室乳头肌的Ca^<2+>瞬态和收缩。另外,我们使用经皂苷处理的薄小梁来研究Ca^<2+>摄取,Ca^<2+>释放和Ca^<2+>泄漏。在抽搐收缩中,Hz,SLN-TG中Ca^<2+>瞬态和收缩的峰低于对照的峰。 CA^<2+>瞬时和张力的降低速率慢于对照。在皮肤纤维中,在不同时期的ATP和Ca^<2+>(PCA 6.2)的情况下,将Ca^<2+>加载在SR中,而SR中的Ca^<2+>在SR中被咖啡因释放。我们用Fluo-3测量了释放的Ca^<2+>。当Ca^<2+>加载时间很短时,SLN-TG中Ca^<2+>的摄取速率较慢,但是当加载时间更长时,没有观察到差异。 TG和非TG心肌稳定状态下SR的最大Ca^<2+>没有差异。 ca^<2+> - 在SLN-TG中诱导的Ca^<2+>释放(CICR)与非TG中的CA^<2+>没有差异。通过测量Ca^<2+>加载后无需ATP和Ca^<2+>的溶液中的CA泄漏,可以估算Ca^<2+>泄漏。 Ca^<2+> SLN-TG中的泄漏与非TG中的泄漏没有差异。因此,SLN降低了SR中的Ca^<2+>摄取,并影响细胞内Ca^<2+>浓度。 SLN在Beat-Beat收缩中的作用很重要,但是SLN在稳定状态下并没有发挥重要作用。

项目成果

期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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  • DOI:
    10.1128/mcb.24.24.10611-10620.2004
  • 发表时间:
    2004-12-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    5.3
  • 作者:
    Nishida, K;Yamaguchi, O;Otsu, K
  • 通讯作者:
    Otsu, K
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Mio Y
  • 通讯作者:
    Mio Y
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